收稿日期院圆园园怨 原 园怨 原 员缘曰修回日期院圆园园怨 原 园怨 原 圆园 作者简介院李宁渊员怨苑源 原 冤袁女袁讲师袁医学硕士袁主要从事骨关节病教学与临床工作遥 桃红四物汤加味对膝关节骨性关节炎大鼠关节软骨中 酝酝孕鄄员 及 栽陨酝孕鄄员 的影响 李摇 宁员 袁宋摇 敏员 袁宋志靖员 袁谢兴文圆 渊员援 甘肃中医学院袁甘肃 兰州摇 苑猿园园园园曰圆援 甘肃省中医医院袁甘肃 兰州摇 苑猿园园缘园冤 摘摇 要院目的摇 探讨桃红四物汤加味防治膝关节骨性关节炎的机制遥 方法摇 选用 宰蚤泽贼葬则 大鼠 缘园 只袁随机分为空白组尧模型组尧四妙汤组尧桃红四物汤组渊简称桃红组冤和吲哚美辛组袁后 源 组进行膝关节 骨性关节炎模型制作袁用药 远 周后处死动物袁免疫组化法检测 酝酝孕鄄员 及 栽陨酝孕鄄员遥 结果 桃红组和吲哚 美辛组大鼠与模型组比较袁酝酝孕鄄员 的表达均有不同程度的降低渊孕 约 园援 园缘冤袁而 栽陨酝孕鄄员 的表达均有不同 程度的升高渊孕 约园援 园缘冤遥 结论 桃红四物汤加味能有效地抑制 匀怎造贼澡 法诱导的大鼠膝关节骨性关节炎 软骨中 酝酝孕鄄员 的表达袁促进关节炎软骨中 栽陨酝孕鄄员 的表达遥 四妙汤加味对模型大鼠膝关节骨性关节炎 软骨中 酝酝孕鄄员袁栽陨酝孕鄄员 的表达则无明显作用遥 摇摇关键词院桃红四物汤曰四妙汤曰膝关节骨性关节炎 中图分类号院砸圆愿缘援 缘摇 文献标识码院月摇 文章编号院员园园猿 原 愿源缘园渊圆园园怨冤园远 原 园园员圆 原园猿 摇摇骨性关节炎渊韵泽贼藻燥葬则贼澡则蚤贼蚤泽袁韵粤冤 是指人体中轴 关节及外周动关节最常见的退行性疾病袁是以关节 软骨进行性变性和消失尧关节边缘和软骨下骨质的 反应性变化为病理特点的疾病袁临床上又称退行性 关节炎尧增生性关节炎尧骨关节病等咱员暂 遥 以膝关节骨 性关节炎渊运韵粤冤最多见遥 其病因十分复杂袁其中关 节软骨细胞外成分的合成减少和降解增加是造成 韵粤 软骨变性的重要因素之一遥 研究发现基质金属 蛋白酶渊酝酝孕泽冤在细胞外基质降解中有不可替代的 作用袁而基质金属蛋白酶组织抑制物渊栽陨酝孕泽冤可抑 制基质金属蛋白酶的活性咱圆 原 猿暂 遥 因此袁栽陨酝孕泽 在关 节软骨细胞外基质的重建和降解中起重要作用遥 近 年国内逐渐重视中医药防治 韵粤 的研究袁报道主要 以活血化瘀尧补气养血法较为常见袁其有效性在临床 和实验研究中得到证明袁但利湿化痰的治疗原则临 床报道较多袁而实验研究较少遥 临床治疗 运韵粤 多应 用活血化瘀治法的代表方剂桃红四物汤加减及利湿 化痰治法的代表方四妙汤加减袁在临床上均有一定 的疗效遥 为了进一步探讨这两首方剂防治 运韵粤 的 机制袁我们采用免疫组化法观察了大鼠 运韵粤 股骨下 端膝关节软骨中基质金属蛋白酶 原 员渊酝酝孕鄄员冤和基 质金属蛋白酶组织抑制物 原员渊栽陨酝孕鄄员冤的变化袁探 讨药物对 运韵粤 关节软骨中 酝酝孕鄄员 及 栽陨酝孕鄄员 的影 响及 酝酝孕鄄员 及 栽陨酝孕鄄员 与 运韵粤 发病的机制遥 员 材料与方法 员援 员 实验动物 杂孕云 级健康 宰蚤泽贼葬则 大鼠 缘园 只袁 质量 渊圆缘园 依 圆园冤 早袁由甘肃中医学院动物中心提供袁实验动物质 量合格证编号院杂悦载运渊甘冤圆园园源 原 园园园远 原 园园园园圆园缘遥 员援 圆摇 实验药物及试剂 员冤桃红四物汤院一次性申购原药材袁在我院实 验楼药剂实验室制备成汤剂袁含生药质量浓度为 圆早辕皂蕴遥圆冤四妙汤院一次性申购原药材袁在我院实 验楼药剂实验室制备成汤剂袁含生药质量浓度为 圆早辕皂蕴遥猿冤西药对照药院吲哚美辛片由临汾奇林药 业有 限公司生产袁 批号园苑园员猿员员袁 国药准字号匀员源园圆园缘源怨遥 源冤戊巴比妥钠由中国医药集团上海 化学试剂公司生产袁批号 云圆园园猿园愿员远遥 缘冤青霉素由 华北制药股份有限公司生产袁 国药准字匀员猿园圆园远缘缘袁批号 云园远园猿猿员缘遥 远冤 试剂院酝酝孕鄄员 免疫 组化试剂盒尧栽陨酝孕鄄员 免疫组化试剂盒均由福州迈 新生物技术公司提供遥 即用型免疫组织化学超敏 杂孕 试剂盒采用生物素标记的第 圆 抗体与链霉菌抗 生物素蛋白连接的过氧化物酶及底物色素混合液 来测定细胞和组织中的抗原遥 员援 猿 实验方法 员援 猿援 员摇 动物饲养 杂孕云 级实验室袁温度 圆园 耀 圆缘 益 袁湿度 源缘 豫耀远缘 豫 袁光照明暗各 员圆 澡遥 员援 猿援 圆摇 动物分组 将 缘园 只大鼠称重编号后按随机数字表随机分 为四妙汤组尧桃红四物汤组渊简称桃红组冤尧吲哚美 辛组尧模型组尧空白组袁每组 员园 只遥 要圆员要第圆远 卷第远期圆园园怨 年 员圆 月摇摇摇摇摇摇摇甘肃中医学院学报允郾 郧粤晕杂哉 悦韵蕴蕴耘郧耘 韵云 栽悦酝 摇摇摇摇摇摇摇灾燥造郾 圆远摇 晕燥郾 远 阅藻糟郾 圆园园怨 员援 猿援 猿摇 动物造模 用 匀怎造贼澡 法造模咱源暂 袁猿豫戊巴比妥钠 源 皂蕴辕 噪早 麻醉后渊腹腔注射冤袁仰卧固定袁膝关节稍屈曲袁切除 大鼠膝关节前后交叉韧带及内侧副韧带袁切除内侧 半月板袁破坏大鼠膝关节正常的力学轴线袁青霉素 缘 伊员园缘 哉辕 渊次窑只冤袁连续肌注 苑凿以预防感染遥 员援 猿援 源摇 动物给药 员冤空白组院生理盐水灌胃袁愿 皂蕴辕 噪早袁圆 次辕 凿袁连 续给药 远 周遥 圆冤模型组院生理盐水灌胃袁愿 皂蕴辕 噪早袁 圆 次辕 凿袁连续给药 远 周遥 猿冤 四妙汤组院四妙汤汤剂 灌胃袁愿 皂蕴辕 噪早袁圆 次辕 凿袁连续给药 远 周遥 源冤桃红组院 桃红四物汤汤剂灌胃袁愿 皂蕴辕 噪早袁圆 次辕 凿袁连续给药 远 周遥 缘冤 吲哚美辛组院 吲哚美辛片混悬液灌胃袁 愿 皂蕴辕 噪早袁圆 次辕 凿袁连续给药 远 周遥 员援 猿援 缘摇 取材 采用断颈处死袁截取股骨下段包括关节软骨袁 再按检测指标的要求处理标本遥 组织标本均置于 源豫的甲醛中固定袁常规脱水袁石蜡包埋袁连续切 片袁厚度约 缘 滋皂遥 员援 猿援 远摇 测定指标及检测方法 免疫组化法检测 酝酝孕鄄员 及 栽陨酝孕鄄员遥 软骨标 本脱蜡至水袁先后加入过氧化物酶阻断溶液及正常 羊血清孵育袁再依次加一抗尧生物素标记二抗尧链亲 和素一过氧化物酶溶液及 阅粤月 溶液袁其间均充分 水洗袁苏木素复染封片观察遥 员援 猿援 苑摇 统计学处理 实验数据采用 杂孕杂杂员猿援 园 统计软件处理袁样本 之间均数比较采用单因素方差分析遥 圆摇 实验结果 见表 员遥 表员各组大鼠膝关节软骨组织中 酝酝孕鄄员袁 栽陨酝孕鄄员 含量比较渊 曾依泽冤 组别 灶 灰度值 酝酝孕鄄员 栽陨酝孕鄄员 空白组 员园 员远援 源依圆援 愿银银 园援 猿愿员缘 依 园援 园源源愿银银 模型组 员园 远猿援 怨依员员援 远 园援 圆园缘怨 依 园援 园圆苑苑 四妙组 员园 缘缘援 怨依员愿援 圆 园援 圆园愿圆 依 园援 园圆苑愿 桃红组 员园 员怨援 愿依怨援 远银荫 园援 猿苑苑园 依 园援 园猿远怨银荫 吲哚美辛组 员园 猿圆援 远依员猿援 园银荫 园援 猿缘员圆 依 园援 园猿愿圆银荫 摇摇注院与模型组比较银孕 约 园援 园缘袁银银孕 约 园援 园员 曰与四妙组 比较 荫孕 约 园援 园缘 摇摇模型组与空白组比较袁酝酝孕鄄员 灰度值明显升 高渊孕 约 园援 园员冤曰桃红组和吲哚美辛组与模型组比 较袁酝酝孕鄄员 灰度值明显降低渊孕 约 园援 园缘冤袁四妙组与 模型组比较差异无统计意义曰桃红组与吲哚美辛组 比较差异无统计意义遥 说明桃红四物汤能够抑制 大鼠骨性关节炎软骨中 酝酝孕鄄员 的表达袁而四妙汤 作用不明显遥 模型组与空白组比较袁栽陨酝孕鄄员 灰度值明显降低 渊孕 约园援 园员冤曰桃红组和吲哚美辛组中的 栽陨酝孕鄄员 的灰 度值较模型组明显升高渊孕 约 园援 园缘冤曰四妙组与模型 组比较差异无统计意义曰桃红组和吲哚美辛组比较 差异无统计意义遥 说明桃红四物汤能够抑制大鼠骨 性关节炎软骨的破坏袁抑制金属蛋白酶的活性遥 猿 讨论 猿援 员 桃红四物汤对大鼠骨性关节炎中 酝酝孕鄄员 的 影响 酝酝孕鄄员 是具有降解细胞外基质主要功能的酶袁 参与骨吸收等过程遥 酝酝孕鄄员 是金属蛋白酶类的主 要成员之一袁它可降解细胞外蛋白多糖尧陨载 型胶.
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