PDF《ABScript II One Step SYBR》

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1 ABScript II One Step SYBR Green RT-qPCR Kit 目录: RK20404 规格:

10 RXN /

100 RXN (50 μL 体系/ RXN) 产品组成: 2X One Step SYBR Green RT-qPCR Buffer RM21454 ABScript II One Step Enzyme Mix RM21455 50X ROX Reference Dye I RM21456 50X ROX Reference Dye II RM21457 RNase-free ddH2O RM20214 产品说明 ABScript II One Step SYBR Green RT-qPCR Kit 是采用 SYBR Green I 嵌合荧光法进行一步法 RT-qPCR 反应的专用 试剂盒.本试剂盒以 RNA 为模板,使用基因特异引物,逆转录 和PCR 反应可在同一管内连续进行,不用额外的开管、移液操 作,大大提高了检测通量,并能有效防止污染.本反应体系可 以对扩增产物进行实时检测,大大提高了检测灵敏度,并且省 略了 PCR 反应后的电泳步骤,非常适合于 RNA 病毒等微量 RNA 的检测. 本制品整合了 ABScript II Reverse Transcriptase 和Taq DNA Polymerase 的优越性,配合经过优化的缓冲体系, 具有高扩增效率和高扩增特异性, 能稳定的进行一步 RT-qPCR 反应.此外,反应使用的所有酶都制成了 Enzyme Mix,操作更 加简单方便. 产品规格及组分: 组份

10 RXN (50 μL 体系/ RXN)

100 RXN (50 μL 体系/ RXN) 2X One Step SYBR Green RT-qPCR Buffer *

250 μL 1.25 mL X

2 ABScript II One Step Enzyme Mix **

20 μL

200 μL 50X ROX Reference Dye I ***

10 μL

100 μL 50X ROX Reference Dye II ***

10 μL

100 μL RNase-free ddH2O 1.25 mL 1.25 mL X

2 * 含有 dNTPs, Mg2+, SYBR Green 等. ** 含有 ABScript II Reverse Transcriptase,RNase Inhibitor 和Taq DNA Polymerase. ***用于校正孔与孔之间产生的荧光信号误差. 保存条件: -20℃避光 ROX Reference Dye 适用机型: 50X ROX Reference Dye I ABI

7300 Real-Time PCR System, ABI Step One, ABI Step One Plus 等. 50X ROX Reference Dye II ABI 7500/7500 Fast Real-Time PCR System,Stratagene Mx3000/Mx3005P 等. NO ROX Reference Dye Roche LightCycler480,Roche LightCycler96,Bio-Rad CFX96 等. 注意事项 1. 使用 2X One Step SYBR Green RT-qPCR Buffer 时,请充 分融解,混匀后使用,避免强光直射,并注意避光保存.若 同时需要配制多个 One Step RT-qPCR 反应时,推荐将除 引物与模板外的所有组分配制成预混液, 然后再分装到每个 反应管,减少试剂损失. 2. 试剂盒中的 ABScript II One Step Enzyme Mix 含有高浓度 甘油,在使用前请轻轻混匀,避免起泡;

使用前请瞬时离心 后使用.使用后立即放回-20℃冰箱保存. 3. 反应液的配置和分装一定使用无污染的枪头、Microtube, 尽量避免污染. 4. 为保证反应的成功,建议使用高质量的 RNA 模板. 5. 本试剂盒只能使用特异性引物,不能使用随机引物或 Oligo dT 引物等进行反转录反应. 6. 一步法 RT-qPCR 实验设计用于扩增的引物时,推荐产物长 度在 100~200 bp,效果最佳. 操作说明 实验准备: ? 1.5 mL RNase-free EP 管、RNase-free PCR 管、移液器和 枪头、冰盒或冰. ? PCR 引物与模板. ? 荧光定量 PCR 专用管或平板. 订购:[email protected] 本产品仅供科学研究,不能用于人、动物的诊断或治疗 技术支持:[email protected] 获取完整产品列表,请访问 http://abclonal.com.cn

2 实验方法: 用户需自备的试剂:RNA 模板、引物.请按照不同品牌荧光定 量PCR 仪的使用说明书要求进行实验操作. 1. 配制 One Step RT-qPCR 反应体系: 推荐冰上配制反应体系, 以20μL 反应体系为例: 组份 加入体积 加入体积 2X One Step SYBR Green RT-qPCR Buffer