PDF《(DLAT/E2)酶联免疫吸附测定 试剂盒使用 说明书》

5 分钟 , 取上清即可检测.

4、 其它生物标本:请1000 g 离心

20 分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20 或-

80 保存,但应避免反复冻融. 注注注注意 意意意: : : :

1、 以上标本均需密封保存,4 保存应小于

1 周,-20 不应超过

1 个月,-80 不应超 过2个月.

2、 标本使用前应缓慢均衡至室温,不应加热使之融解.

3、 标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测. 试剂 试剂 试剂 试剂准备 准备 准备 准备

1、 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25 ),试剂不能直接在

37 溶解.

2、 标准品(冻干品) :每瓶 标准品用标准品稀释液稀释至 1mL,盖好后室温静置大约

10 分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解, 其浓度为

200 U/L.准备

7 个稀释标准品的EP 管, 每个 EP 管中加入

500 的标准品稀释液, 如图所示依次倍比稀释成

200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,标准品稀释液(0 U/L)直接 作为空白孔.为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液. Tube Tube Tube Tube

1 1

1 1

2 2

2 2

3 3

3 3

4 4

4 4

5 5

5 5

6 6

6 6

7 7

7 7

8 8

8 8 U U U U/L /L /L /L

200 200

200 200

100 100

100 100

50 50

50 50

25 25

25 25 12.5 12.5 12.5 12.5 6.25 6.25 6.25 6.25 3.12 3.12 3.12 3.12

0 0

0 0

3、 检测稀释液 A A A A 及检测稀释液 B B B B:用6mL 蒸馏水或去离子水将 6mL 浓检测液 A 及B稀释至 12mL,进行

2 倍稀释,稀释后的工作液不宜进行冷冻保存.

4、 检测溶液 A A A A 及检测溶液 B B B B:Detection A 及Detection B 在使用前请手甩几下或少时 离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底.临用前分别以检测稀释液 A A A A 或BBBB1:100 稀释(如:10 检测溶液 A /

990 检测稀释液 A),充分混匀,稀释前根据预 先计算好的每次实验所需的总量配制 (100 /孔) ,实际配制时应多配制 0.1-0.2mL.

5、 浓洗涤液:用580mL 蒸馏水或去离子水将 20mL 浓洗涤液稀释至 600mL,进行

30 倍 稀释.

6、 底物溶液:请用灭菌的移液器吸头吸取所需体积的 TMB 至另一干净容器中使用,容 器中剩余的底物应予丢弃,不要倒回 TMB 瓶中. 注注注注意 意意意:

1、 标准品请于临用前

15 分钟内配制.该标准品只能使用一次.

2、 标准品的稀释不能直接在板中进行.

3、 标准品、检测溶液 A A A A 工作液、检测溶液 B B B B 工作液请使用相应的稀释液配制,不能混 淆.混匀时要轻轻充分混匀,避免起泡.为保证实验结果的准确请使用微量吸管,并 校准微量加液器.请依据所需的量精确配制,尽量不要微量配制(如吸取检测溶液 A A A A 时,一次不要小于

10 ) ,以避免造成浓度误差.

4、 请勿重复使用已经稀释过的标准品、检测溶液 A A A A 工作液和检测溶液 B B B B 工作液.

5、 浓洗涤液中如有结晶析出,请先温育至室温,轻轻混匀,至到结晶完全溶解再进行配 制. 操作步骤 操作步骤 操作步骤 操作步骤 实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符 合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数.

1、 加样:分别设标准孔、待测样品孔、空白孔.设标准孔

7 孔,依次加入

100 不同 浓度的标准品(见试剂准备 2).空白孔加

100 (见试剂准备第二步最后一管) ,余 孔加待测样品