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中国水产科学 Journal of Fishery Sciences of China 第16卷第4期2009年7月Vol.

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0 9 收稿日期: 2008-10-30;

修订日期: 2009-01-22. 基金项目: 国家自然科学基金资助项目 (30671619) ;

浙江省重点科技计划项目 (2004C23041 ) . 作者简介: 施大卫 ( 1983-) , 男, 硕士研究生, 主要从事海洋生物分子免疫学研究. E-mail: [email protected] 通讯作者: 吴信忠 ( 1957-) , 教授, 博导, 从事海洋生物分子免疫及疾病防治. Tel: 0571-86971960;

E-mail: [email protected] 青石斑鱼细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ (COXⅠ ) 基因的克隆鉴定及表达分析 施大卫1,

2 , 王利1 , 娄绘芳1 , 黄艳青1 , 朱保建1 , 吴信忠1 ( 1. 浙江大学 动物科学学院, 浙江 杭州 310029;

2. 北仑出入境检验检疫局, 浙江 宁波 315800) 摘要: 细胞色素氧化酶 (Cytochrome oxidase, COX) 是线粒体内呼吸链电子传递的终末复合物, 是线粒体氧化能力的关键调 节物质.细胞色素C氧化酶亚基I (COXⅠ ) 是细胞色素C氧化酶具有酶催化活性的3个亚基之一.本研究以本实验室构 建的青石斑鱼消减杂交cDNA文库中长587 bp的EST序列为基础, 采用RACE-PCR方法克隆鉴定出青石斑鱼 (Epinephelus awoara) 细胞色素C氧化酶亚基I基因.研究结果表明: 青石斑鱼COXⅠ全长1

659 bp, 5′ 端非编码区3 bp, 3′ 端非编码区105 bp, 开放阅读框1

551 bp, 编码516个氨基酸.序列分析表明, 青石斑鱼COXⅠ与线纹刺尾鲷COXⅠ同源性最高, 达96.9%. 采用半定量RT-PCR 方法研究COXⅠ基因在青石斑鱼各组织中的表达特征, 结果表明COXⅠ基因在正常的青石斑鱼和注射 了副溶血弧菌灭活疫苗的青石斑鱼的脾、 肝、 心、 头肾、 肾、 肌肉和鳃中都有转录表达.注射副溶血弧菌灭活疫苗后, 除了鳃 组织, 其他组织中COXⅠ基因表达量较对照组都有显著提高 (?P?