PDF《说明书》

Genloci pGK2.

2(EGFP+Puror ) vector 说明书 Cat. No. GP0140 Protocol No. PT161215-3 出版日期 Dec.

2016 南京市汉中门大街

301 号 南京国际服务外包产业园

01 栋13 层A座

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2 III. 产品概要…3-4 IV. 操作步骤…5 1. 设计 Oligo DNA 序列…5 2. pGK2.2(EGFP+Puror ) vector 线性化处理…6 3. 获得双 gRNA 克框…6 4. 片段的胶回收和酶切…6 5. T4 DNA Ligase 连接和筛选…6-7 6. 电转染靶细胞…7 7. Cruiser? 筛选阳性克隆…7 V.FAQ…8 VI. 附录…9 VII.参考文献…10 图Figure 1. CRISPR/Cas9 工作原理示意图 Figure 2. CRISPR/Cas9 基因编辑实验流程 Figure 3. pGK2.2(EGFP+Puror ) vector 插入位点图示 Figure 4. pGK2.2(EGFP+Puror ) vector 质粒图谱 Genloci pGK2.2(EGFP+Puror ) vector Protocol No. PT161215-3 www.genloci.com Genloci Biotechnologies Inc. 2/10 I.规格与贮存条件 在收到货后,请您先瞬时离心后再置于-20℃保存,且避免污染;

Cat. No. 产品名称 规格 GP0140 pGK2.2(EGFP+Puror )

4 μg II.附加产品推荐 本试剂盒不包含以下所需试剂和仪器,您可以购买指定产品或购买替代产品进行实验. ? Genloci TNA 抽提试剂盒 (Cat.No.:GP0155,GP0156) ? Genloci Cruiser? 基因敲除检测试剂盒 (Cat.No.:GP0102,GP0103) ? Genloci Cruiser? Enzyme (Cat. No.:GP0104,GP0105,GP0106) ? Celetrix 细胞电转仪 (Cat.No.:GP7901) ? Cell Plaza? 单细胞培养板 (Cat.No.:GP5036) ? Annealing Buffer(10x) (Cat.No.:GP0124,GP0125) Genloci pGK2.2(EGFP+Puror ) vector Protocol No. PT161215-3 www.genloci.com Genloci Biotechnologies Inc. 3/10 III.产品概要 Genloci pGK2.2(EGFP+Puror ) vector 是一款高效、精准的基因编辑载体,它是基于最新一代的人工核 酸内切酶 CRISPR/Cas9 而研发的,相对于传统敲除技术和 TALEN、ZFN 技术而言,其操作更加简便,敲 除效率最高,基因的编辑更加的精准,大大降低了脱靶机率.Genloci pGK1.2(EGFP+Puro) vector 试剂盒 能够适用于几乎所有哺乳动物细胞的基因修饰研究. Genloci Pgk2.2(EGFP+Puro) vector 包含

2 个重要组件,分别为 Cas9 核酸酶表达框和 Guide RNA(gRNA)克隆框,gRNA 克隆框能够快速高效的克隆编码靶标特异的 CRISPR RNA(crRNA)的DNA 片段.该载体能够让您仅靠单个载体就可以轻松地完成基因组 DNA 的编辑,实现精准、低off-target 的基因 编辑体验. Genloci 公司为您提供完整的基因敲除解决方案, 从敲除方案设计→敲除位点设计→载体构建→转染→ 敲除检测→结果分析,让您的实验一次成功! 产品特点精准的修饰 Cas9 蛋白无特异性,降低脱靶效应,实现精准的基因编辑 敲除效率高 较传统技术和 TALEN、ZFN 技术,敲除效率最高;

CRISPR/Cas9 系统的两大功能组件于一个载体上,转染效率更高. 双敲除:gRNA 克隆框含有两个敲除插入位点,可以实现同基因大片段的缺失或同时敲除两个不同基因. Figure1. CRISPR/Cas9 工作原理示意图 Genloci pGK2.2(EGFP+Puror ) vector Protocol No. PT161215-3 www.genloci.com Genloci Biotechnologies Inc. 4/10 CRISPR/Cas9 基因编辑实验流程图如下: Figure 2. CRISPR/Cas9 基因编辑实验流程 设计