PDF《鸡粪中的有机酸及其对土壤速效》

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2 , 避免粪肥热量损失和防止人为升温的影响.每天定时观察粪肥温度和调节培养箱温度.重复

30 次.每周取粪肥两盒, 测定有机酸、 pH 等项目. 1. 2.

2 有机酸的提取 参考Thomas[ 7] 等人的方法, 简要过程如下: 称取

10 00g 的粪肥样品, 用pH 值为11 的碱性乙醇溶液浸提24h, 振荡30min 后离心;

上清液过731 型阳离子交换树脂柱, 酸化至pH 值为2 左右.用蒸馏法提取挥发性有机酸;

用蒸馏的残液提取不挥发性有机酸.将残液用 NaOH 溶液中和后, 在水浴上蒸干;

用饱和 NaHSO4 溶液酸化残渣, 再用

1 1 的氯仿 正丁醇溶液反复浸提数次, 浸提液用浓 氨水调至 pH 值为 8~ 9, 再用少量蒸馏水萃取数次, 将萃取液置于 P2 O5 干燥器中浓缩至 2~ 3ml, 再转入 含浓盐酸的干燥器中沉淀腐殖酸, 离心;

将上清液置于含 P2O5 和钠石灰的干燥器中除去水分和 HCl.将 结晶用乙醚连续提取

24 小时, 将乙醚提取液蒸干, 残渣用 70% 的乙醇溶解并定容至 5ml. 1. 2.

3 培养试验 土壤培养试验 主要研究鸡粪对石灰性土壤的 N、 P、 K 等养分的有效性的影响. 用装土

0 5kg 的塑料盒在恒温培养箱中进行培养.试验共设

3 个处理: CK 不加有机肥;

鸡1 每盒加鸡粪

16 7g;

鸡2 每盒加鸡粪

33 3g.将土壤和有机肥混匀后, 装入盒中, 加水至含水量 200g kg-

1 , 用塑料袋封 口, 防止水分过度蒸发.然后放入

25 培养箱中培养.每处理重复

10 次.每隔一周测定一次含水量、 速效N、 P、 K 及土壤 pH 值, 并补加水分.土壤培养试验 用分析纯的琥珀酸、 乳酸、 柠檬酸和草酸分 别配制两种浓度的有机酸及其混合液溶液培养土壤, 试验处理见表 1.称取过

0 5mm 的风干土

2 5g, 各 加入5ml 有机酸溶液, 重复

5 次, 在25 条件下培养 24h, 然后用 Olsen 法测定土壤速效磷含量.培养液 中各加入 10g L-

1 的HgCl2 和NaN3 抑制土壤微生物和酶的活性. 表1各种有机酸的浓度 Table

1 The concentration of organic acids ( g L- 1) 处理水平 蒸馏水 琥珀酸 乳酸 柠檬酸 草酸 混合酸 Treatment Distilledwater Succinic acid Lactic acid Citric acid Oxalic acid Mixed acid 处理 1(T1) 5.

0 1.

5 0.

5 0.

5 5. 0+ 1. 5+ 0. 5+ 0.5 处理 2(T2) 10.

0 3.

0 1.

0 1.

0 10. 0+ 3. 0+ 1. 0+ 1.0 1.

3 测定方法 有机酸总量的测定、 挥发酸总量的测定, 将蒸馏液装入带有长玻璃管的橡皮塞的三角瓶中, 加热沸 腾10min, 除去 CO2 .然后, 加一滴酚酞指示剂, 用0005mol L-

1 的NaOH 标准液滴定.不挥发酸总量的测 定, 取1ml 提取液, 加10ml 蒸馏水, 然后用 NaOH 标准液滴定. 不挥发酸组分的分析用英国 VG 公司生产的 TRI02000 型GC MS DS( 气相色谱- 质谱信息系统) 进269

2 期 王林权等: 鸡粪中的有机酸及其对土壤速效养分的影响 行.上机前, 样品用重氮甲烷法甲酯化.分析条件, 柱型: SE -54 30m

0 25mm 石英毛细管柱;

柱温: 60~

300 , 程序升温

7 min-

1 , 并在

300 保持 20min;

进样口温度:

290 ;

电子轰击源;

倍增器电压: 650V;

发 射电流:

0 25mA;

电子能量70eV;

源温:

180 ;

扫描范围: 30~ 500amu.通过计算机检索系统, 进行未知物 的鉴定, 根据分子离子峰面积计算各种物质的相对含量. 多元羧酸的测定, 用NIHON WATERS LTD 型高效液相色谱仪测定.分析条件, 柱高: Microbondapak C18;