PDF《读书报告》

2 . Materials and methods 高通量测序分析 交由GENEWIZ,Inc.(金唯智,中国苏州)进行. 益生菌停喂处理 在第7周(益生菌喂养停止后第7天)后,每个重复取三条鱼,通过高通量 测序测序以评估益生菌在中肠内存在的持久性. 免疫相关的基因表达 选择的免疫相关基因是TNF-α,IFN-γ,lyz-c,hsp70和IL-1β,以β-actin为 内参.

2 . Materials and methods 肠道组织学观察 每个重复取3条鱼的肠道进行扫描电子显微镜(SEM)和透射电子显微镜(TEM)观察. 将样品(约2mm)在1%S-羧甲基-L-半胱氨酸中洗涤30秒(仅SEM)以除去杂质,然后 使用2.5%戊二醛缓冲液(0.1M pH 7.2)进行固定. SEM图像(*30,000)用于测量微绒毛密度. TEM图像(*6000)用于测量微绒毛长度. 攻毒实验 6周后,每个重复选取25条鱼进行腹腔注射20μl无乳链球菌(LD50 = 1*105 CFU/ml), 无乳链球菌由患病的尼罗罗非鱼的鳃中分离出.将该菌株在37℃厌氧条件下于脑心浸液培养 基中培养48小时.然后以2000g离心5分钟.用磷酸盐缓冲液洗涤沉淀两次,细菌数量通过比 浊法测定.注射后2周内进行监测其临床症状,死后病变情况和每日死亡率.

03 Results and discussion

3 . Results and discussion 罗非鱼的生长性能的表现与特定益生菌菌株的抗菌活性差异以及个体差异有关. 综合其他文献结果,机体生长性能是益生菌,肠道微生物组,饮食,宿主,研究条件和处 理实践等因素之间相互作用的结果. 结果表明:益生菌可以通过改 善微绒毛密度和微绒毛长度增 加肠道吸收表面积.此外,较 高的微绒毛密度可以减少肠细 胞暴露,增加紧密连接水平, 对阻止潜在病原体提供更有效 的屏障.

3 . Results and discussion Hsp70可以促进蛋白质结构的保护作用,增强免疫系统 并停止细胞凋亡机制.研究发现了乳酸乳球菌能诱导更 高的全身hsp70. IFN-γ在先天性和适应性细胞介导的免疫反应中起主要作 用,它主要去除细胞内的病原体,可以通过它来提高 TNF-α和IL-1β.IL-1β和TNF-α的表达变化,可能与细菌 对肠壁的粘附特性有关(JCM5805是一种肠粘性细菌). C型溶菌酶参与对细菌病原体的反应,研究表明,这种 转录被强烈的细菌攻击或LPS注射而快速激活,当以组 合形式进行益生菌补充时,不同的益生菌应该会以协同 作用来影响机体健康.

3 . Results and discussion 攻毒后罗非鱼的存活率表明,每组均在 第一天达到最高每日死亡率.与对照组相 比,罗非鱼饲喂益生菌的存活率显着提高. 在LL组中观察到最高的存活率,而LR组和 LR + LL组之间存活率的差异没有统计学意 义(P> 0.05),但与LL组相比,显着降低 (P