PDF《中国病毒学》

第l5卷 4期2000年

1 2月中国病毒学VlRo I OGl CA SI NI CA VoI

15 No

4 】 ) ec .

20On .

3 7 f ,;

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7 犬细小病毒中国内蒙株 V P

2 基因克 / 董江丽,李 淑芬,张鹤 龄―――一 ( 内蒙 古 大学 生命 科学 院.砰和 浩特

0 l

0 0 2I ) ( 内蒙古 农 业大 学生 物工程系 , 呼和 浩特

01 0 0I

8 ) 列分析.S2(摘要 :从我国内蒙 古地区流 行的犬细小病 毒病 病犬的肠溶 物中分离提 纯犬 细小病毒(CPV) . 提取病毒基因组 DNA, 并 以此 DNA为模 板.采用人 工合成的引物进 行PCR扩 增.PCR产 物经出Hl、SacI双酶切后.克隆 于pUC1 9质粒 的BarnH I / S ~ c l 位点.重 组质粒pUC VP 2经PCR鉴芒、 限制酶切 分折和序列分 析,结果表明:获得 了犬 细小病毒内蒙 株(CPV― I M ) VP 2基因的全长克隆.VP

2 基 因全 长1755lit.与国外 报道的美国1株 ( CP V― N) 、 美国2株 ( c P vI B) 和猫 全 白细 胞减少症病毒(FP1.V) 的棱苷酸序列同源性分别为99.32%、

9 8

2 9 % 、

9 8 .

5 2 %. 氨基酸序列同源性分别为98 87% 、

9 7. 09% 、 97. 77% . 关键 调 :犬细 小病毒;

V P 2基因;

序列分 折 中围 分5―.{犬细 小病 毒( C a n i n e P a r v o v i r u s ,C P V) 属 自主复制 的细 小病 毒,该病毒可 引 起犬 细 小病 毒病,又称犬 细小病 毒性肠 炎. 本病 以剧 烈 呕吐 、 出血性 肠炎 、 白细 胞显著 减少 为主要 特征, 不同 品种 和年龄 的 犬都 易感, 幼犬 在16周 出现 心肌炎 、 死亡 率高达

2 0 % ~1

0 0 %I l 】 . 目前 , 国 内主 要 采用 C P V 灭活疫 苗和 犬五联 弱毒疫 苗进行 免 疫预 防. 由于 母 源抗 体 的干 扰及CP V 毒株在强大 的 免疫 压 力下 产生抗 原漂移 , 常导 致免疫 失败 .1

9 9 3年, 布 日古 德等 用HA和HI 调查内蒙警 犬 基地 的CPV感染 , 结 果表 明, 在正 常接种 下,感染率 高达

2 6 %I

2 ] . 细小病 毒是 目前 动物病毒 中最 小、最简单 的 一类 单链 线状DNA病毒.CP V 病毒粒体直径为

2 5 n m, 无 囊膜 . 呈二 十 面体, 其基 因组为单 链、负链 D NA, 全长5323nt.基 因组 包括两 个 开放 阅读框 架(ORF ) 、

3 端OR F编 码结 构蛋白、

5 端ORF编 码非结 构蛋白. 由晚 期 启动 子起始转录 的结构 蛋白基因包括vP l和VP

2 , VP 2位于VPI的 c端 , 且二者终止于同一密码子 J .L a n g e v e l d等的研 究表 明;

CPV粒 体表面由60个结 构蛋白亚 单位 装配而成 . 其中VP

2 占到5O个 以上,vP l不足l0个 . VP 2基因的N端及该基因上的蛋白转角结构区loopi和 l c o p 3是重 要的B细胞抗 原表位 区, 可诱导 机体产 生 中和性 抗体 , 这些区域 氨基酸残基的 变化是导致 C P V 毒 株抗 原漂移的主要原因… .我们从内蒙古地区的病 犬肠溶物中分离提纯CPV, 扩增并 克隆 了CPVVP 2基因, 进行了序 列分 析,比较 了我 国CPV毒株与国外 C P V 毒株_

3 间及 其与同属 的FPLv_

5 在 核苷 酸和 氨基酸序 列上的差 异, 为进 一步 研 制新 型疫 苗打收穑日期 :

1 9

9 9―0 7―0

5 . 恪回日期 :

1 9

9 9―0 9―0

6 基盘项目: 内蒙 古 自然 科学 基 盘资 助项目(

9 8

0 2

0 2 ) 作者简介 : 董江丽 (

1 9

7 1 年一) . 女, 内蒙 古 包头 市人.硕士研 究生.内蒙 古大 学讲师. 维普资讯 http://www.cqvip.com 中国病毒学下基础.国内尚未 见有关CPVVP 2基固序列分析的报道.1材料与方 法第15卷