PDF《凋谢与肿瘤》

21112 凋谢小体形成: 胞浆泡状突起与胞体分离, 形成多个大小不一的膜被小体即凋谢小体(apop to t2 ic body).典型的凋谢小体中含有一个或数个核碎 片, 或仅有膜被胞浆, 而无核碎片.小体内细胞器聚 集, 但结构完整.如凋谢的细胞原有核较大, 胞浆较 少者如淋巴细胞这样的细胞, 其凋谢小体几乎为核 碎片所充满.

21113 凋谢小体被吞噬: 凋谢小体除被巨噬细胞吞 噬外, 邻近的实质细胞如上皮细胞或肿瘤细胞也可 ・

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3 ・ 第4期凋谢与肿瘤 ・367・ 吞噬.其被吞噬的机制可能是由于凋谢小体被膜的 改变, 细胞表面糖蛋白失去唾液酸侧链, 使原来处于 隐蔽的单糖暴露出来, 而与吞噬细胞表面的植物凝 集素结合. 又细胞凋谢时, 其表面的磷脂酰丝氨酸可 以从细胞膜内外翻到膜外, 可被吞噬细胞表面的相 应受体识别而将其吞噬[6 ] .凋谢小体形成仅需几分 钟, 而被邻近细胞吞噬分解也只需几小时. 被吞噬的 凋谢小体迅速被溶酶体所降解, 仅存留少量难以被 消化的物质形成残留小体 (residual body) , 应注意 的是, 被吞噬的凋谢小体易与自噬泡 (autophagic vacuo le) 相混淆.但凋谢小体的胞浆成分与吞噬凋 谢小体的细胞本身的胞浆成分有一定的差异, 如在 凋谢小体内有核碎片, 若同时在细胞外有凋谢小体, 则易与自噬泡相区别. 附图 细胞凋谢形态演变模式图 1. 实质细胞 2. 染色质靠边, 胞浆浓缩、 发芽 3. 核裂解, 细胞器完好 4. 凋谢小体形成 5. 巨噬细胞 6. 吞噬

212 光学显微镜观察 光镜下, 由于观察到的凋谢 细胞处于形成过程不同的阶段, 受累细胞大小和核 浆比不同, 故其形态不尽相同. 凋谢细胞一般在组织 中单个散在分布, 但也可呈点或小片状. 凋谢细胞与 周围细胞离解, 或其周有空晕.在HE 梁色片中, 凋 谢细胞胞浆红染, 核染色致密呈蓝黑色, 有时可见核 裂解的碎片. 典型的凋谢小体呈圆形或卵圆形, 胞浆 呈强嗜酸性, 内含有核碎片, 或无核碎片仅为一强嗜 酸性胞浆小体. 一般而言, 只有较大的凋谢小体方能 在光镜下见到.用Feulgen 染色, 凋谢细胞浆呈绿 色, 而浓缩的核或核碎片呈紫红色.用吖啶橙 (acri2 dine o range) 染色涂片, 在萤光显微镜下观察, 可见 细胞浆 RNA 为桔红色, 有时可见泡状突起于细胞 表面, 细胞核DNA 呈致密浓染的黄绿色或呈黄绿 色的核碎片[7 ] . 近年来, 应用末端标记法如去氧核苷 酸末端转移酶染色法(term inal deoxynucleo tidyl transferase, TDT ) , 此法末端去氧核苷酸转移酶在 凋谢细胞DNA 断裂处, 将带有生物素标记的核苷 酸连接上.通过显示此生物素即可检测到DNA 断 裂端.当细胞发生凋谢时, 细胞核的DNA 出现数个 断裂点, TDT 法可把细胞核染成多个棕色颗粒, 是 为阳性着色[8 ] .TDT 法对坏死细胞不着色或有较均 一的非特异性着色, 此系由于坏死细胞 DNA 随机 降解之故.细胞凋谢在一般染色未出现明显形态学 改变时, TDT 法即可将断裂的DNA 端点显示出来, 故TDT 法计数凋谢细胞较客观, 其结果也高于一般 染色计数.目前可作为常规对凋谢细胞形态和计量 观察.在细胞凋谢过程中, 由于细胞仍然存活, 故保 存排斥台盼蓝(trypan blue) 的能力. 细胞凋谢与坏死的区别见附表.

3 凋谢的生化改变 目前关于细胞凋谢的详细生化改变尚未完全了 解.W yllie[9 ] 报道经糖皮质激素处理的胸腺细胞, 可 出现形态学上典型的凋谢, 其染色质凝集与内源性 核酸内切酶激活有关.细胞内 Ca2+ 和M g2+ 增高, 可 激活细胞内核酸内切酶. A rends 等[10 ] 观察到内切酶 作用于松驰型的染色质, 可将其 H