PDF《不同居群山丹的核型分析》

3 ~

4 次,将根尖 材料置于载玻片的中央,切取根尖尖部

1 ~

2 mm,滴1~2滴苏木精,盖上盖玻片,用滤纸盖于盖玻片上, 用拇指用力按压,即可观察. 以上

2 种染色处理每 处理压片

3 个,试验重复

3 次. 1? 2?

4 镜检拍照 使用 Olympus BH2 光学显微镜寻找染色清晰、分散而不重叠的分裂中期相拍 照并保存( 在100 倍镜下滴油观察) . 制片后若 不能及时观察照相,可以置于放有湿滤纸的培养 皿中,再放入冰箱中保存

12 h 左右,材料染色会 加深. 1? 2?

5 25 个山丹居群的核型观测 根据以上试验 结果,选择最佳预处理时间及染色、制片方法,取25 个居群山丹的根尖,进行染色体核型观测. 每个居 群观察

10 个个体以上,染色体计数共观察统计

30 个完整的中期分裂相;

核型分析至少测量

5 个不同 个体细胞的染色体. 核型分析参照李懋学等[13] 确定的标准进行;

核0021期刘冬云等:不同居群山丹的核型分析 型类型按照 G. L. Stebbins[14] 标准;

染色体的相对长 度、臂比及类型遵循 A. Levan 等[15] 的命名系统;

核 型不对称系数(% ) = 长臂总长/ 全组染色体总长, 参照 H. Arano[16] 的方法.

2 结果与分析 2?

1 不同预处理时间对细胞分裂指数和染色体质 量的影响 百合属的染色体较大、染色体之间容易相互缠 绕,另外百合属染色体的短臂和随体大都很小、识别 比较困难,因此选择适宜的预处理药剂和预处理时 间,获得分散良好和主次缢痕清晰的染色体图片对 百合属的核型分析尤为重要. 本试验选用秋水仙 素,对2h、4 h、6 h、8 h、9 h、10 h 和12 h 的处理效果 进行了比较. 结果显示,预处理

2 h 对中期细胞分 裂指数及染色体长度没有明显的影响,基本没有染 色体,预处理

4 h 可使染色体浓缩变短,增加中期细 胞分裂指数,效果最好,超过 4h 的染色体并没有更 明显的缩短,反而染色体外轮廓模糊. 2?

2 不同染色及制片方法对染色体图像效果的 影响 采用醋酸洋红染色,染色浅且不均匀,染色体图 像效果不好;

采用苏木精染色,染色深,图像效果清 晰. 压片时用铅笔的橡皮头垂直轻敲盖玻片的方法 既费时间,又容易使细胞破裂,而压片时采用拇指按 压的方法既节约时间,又使细胞完整,染色体图像效 果好. 2?

3 山丹居群的染色体数 各居群山丹均为二倍体种,染色体基数为 x = 12(表2),根尖细胞中的染色体数目均为 2n = 2x = 表225 个山丹居群的核型参数 Table

2 Karyotype index of

25 L. pumilum populations 居群 Population 核型公式 Karyotype formula 核型 Karyotype 最长/ 最短 染色体 Lt/ St 臂比 >

2 的 染色体比例(% ) Ratio of chromosome of arm ratio >

2 核型不对称 系数(% ) Asymmetry index 黑龙江 HLJ 2n = 2x =

24 = 2sm(2SAT) + 10st(2SAT) + 12t 4B 2?

34 100 86?

35 吉林 JL 2n = 2x =

24 = 4m + 12st + 8t 3B 2?

11 83?

33 80?

11 辽宁 LN 2n = 2x =

24 = 2m + 4sm(2SAT) + 8st + 10t 3A 1?

73 91?

70 81?

60 内蒙古 NMG 2n = 2x =

24 = 16st(2SAT) + 6t + 2m 3B 2?

04 83?

30 83?

13 北京 BJ 2n = 2x =

24 = 6m + 2sm + 10st(2SAT) + 6t 3B 2?

88 75?

00 75?

60 甘肃 GS 2n = 2x =

24 = 2m + 2sm(2SAT) + 18st(4SAT) + 2t 3B 2?

24 92?

00 79?

25 山西 SX 2n = 2x =

24 = 2m(2SAT) + + 14t + 6st + 2T 3B 3?

03 83?

00 82?

70 陕西 SHX 2n = 2x =

24 = 4m + 8sm(4SAT) + 6st + 6t 3B 2?