PDF《维普资讯 http://www.cqvip.com》

0 水平 为P8级水平 , 相 当于

1 0 ' 一1

0 ' 病 毒颗粒 ・ 少于 l

0 病 毒颗粒 的样 品往往 被漏检 .P r i n l e A M 等曾对 黑猩 猩做 过试 验.发现每毫升样 品中含

1 0 . H B V病毒颗粒即能导致黑猩猩感染 , 而我 们常用的临床检测方法 其灵敏度远不能达到检测最 低病 毒感染极 限的要求 . 已有报道 证实采用 P C R方法 在正常献血 员 中检测出 H B V ・ D N A携带者口 ] , 为预 防控制 乙型肝 炎的发生 , 迫切需要 建立 一种灵敏快速的 检测手段 . 本实验建立的检测系统将为 HB V - D N A的 临床快速准确诊断提供极 大的便利 . 致谢 浙江淡水水产所曹铮同志 曾协助工 作 在此表 示感 谢. 参考文献1SaRK,S c ~ a r t S・F a l o o n aF, -Ea z y mat i ca mp l ~ . i e a t i c .0 l B _ B 蛐~enomi ~s e q u e n o v s a n d r e s t r i c t i o n s i t 叽ab位如r曲I g I l o 由.f耐c 0喇1ane n ~ a .S c i e n c ~ .1

9 85'2

30 l

1 3

5 0 一l3542Ki m HS,S mi t h l c sn Re c o mb i n a n tf r a g me n t g g s a y f o r g e net a r g e t l / n g b a

9 . d 姐theymc a 踞chainr~llon. Nu c l Ac i d R∞ ,

1 98 8l

1 6l

8 船7―

8 9o

3 3 昊云涛 蔡宜权. H B V - D N A的生物索寡聚校苷酸探针快蘧橙捌 .

1 f l 国病毒学 .

1 9

9 3 j

8 ") :

3 1

0 - -3

1 5

4 Ma n i a l i sT,Fr i t s c h E F,S a a~r o o k J d M o l e c u l a r c l o ni n g . Ne w yo r k,USA:C枷SpringHa r b o r L a b or a t o r y Pr .

1 98

2 维普资讯 http://www.cqvip.com 翦3期方勤等 ;

H B V ― D NA睁PcR二步法扩增及其快逮检测

2 6

5 5 K c n c k o$. 胁RH.[ Z c i mc o n eSM . 吐Detccfioflscxumhe呻鼬 B v l r m D N A i n b w i f h c h r o n i c h e p a t i t i s n st h e 礴*Cret i n 旭吼蠲矗y- 糊 ^删 S d .US A ,1 % 9I踮l2-

31 6

6 S u nc― F ,P a o CC, W uS ― Y. 止&r . f o r h c 岫Bv i r m i n Ⅱ 删d0n州rr脚【聃^h y b | i 血廿ont n a l y - 血.J C 血Mi c i x t ~o 1]

9 8 8I

1 8j g一185

2 R e s e a r c h e s o n T wo - s t e p P C R A mp l i f i c a t i o n a n d a Ra p i d De t e c t i o n o f I - I B V- DNA Fm a gQi n W uYu ma o C a i yi q u a n ( m 蛔岔曲口.A c a d ~ n / a 8/ ~ / o a, Wu h , ~

4 3

0 0

7 1 ) A s p e c i f i c,暑ensi石v e, f a s t a n d c ~r a v e r i l e nt HBV― D NA d e t e c t i on s ys t em h a s b e e n d ec e 】

0 p e d by u

9 t wo- ~ e p PCR e o m b l ni ng wi t h a b i ot l nyl a t e d o l i g o nu e l o o t i d e h yb r i d i z at i o n m e t h o d― n I e s p e c i f i c i t y o f t h e s y s t e m wa s p r o v e d W h y b r i d i z i n g b o t h P ― l a b e l l e d I - L B V― DNA a n d b i o t i n y l a t e d o l i g o n u e l e o t i d e p r ob e s w i t h PCR p r o d u c t s . W e a l s o e xp l o r e d t he s e n s i t i v[ t y o f t h e s y s t em ,w h i c h c a n d et e c t a s l e s s a s a b o ut l 一2HBV― DNA mo l e c ul e s .The c o nve ni e nc e o f t h e s y s t em d e mo n s t r a t ed t h e s i m p l e t wo t e mp e x a ~r e P C R s t e p s a n d f a s t p r o d u c t s d e t e c t i o n wi t h b i o t i n y

1 a t e d o l i o n u c l o o t i d e p r o b e . Th i s s y s t e m m b e u s e d f o r b o t h l a b o r a t o r y a nd c l i ni c a l d e t e c t i o n o f H BV― DNA . Ke y wo r d s HB V― DNA .Two ― s t e p P eR,S o u t h o f n b

1 o t ,B i o t i n y

1 a t e d o l l g o n u c l e o t i d e,Hy b r i d i z a t i o n 维普资讯 http://www.cqvip.com