PDF《ClonePix™ 2》

更少时间,筛选挑取更多 细胞克隆 ClonePix?

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2 更少时间筛选更多克隆 缩短细胞系和抗体开发时间 主要特性: ? 更短时间筛选更多克隆 ? 精确、自动化克隆挑选,避免有限稀 释的错误 ? 优质图像结合智能化分析软件 ? 增加生物治疗药物细胞系开发的产量 经过已有用户证明,ClonePix系统可以显著提高工作效率 和投入产出比.比如,单克隆抗体的筛选时间可以缩短 50%. ClonePix?

2 3 避免有限稀释 有限稀释 ...3周筛选10 000个克隆 ...8周筛选1 000个克隆 ClonePix

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2 3 weeks 挑取表达水平最优的细胞克隆 ? 使用半固体培养基培养细胞,获得独立的单个细胞克隆 ? ClonePix系统可以快速筛选上万个克隆 - 大大增加找到最优克隆的概率 - 白光成像用于识别克隆位置 - 荧光成像用于定量表达水平 ? 多种检测方法可选 - 不用标记,直接检测杂交瘤分泌的IgG或抗原特异性MAbs - 检测加入标记的重组蛋白或表达的荧光标记蛋白 ? 客观的成像分析,使用户可以准确筛选到最优表达水平的克隆, 并尽可能早的排除表达水平低的干扰克隆 ? 准确、自动化的挑取克隆,避免出现类似有限稀释的错误 满足药品监管的要求 针对人IgG的项目,使用不含动物源成份的试剂: CloneMedia,CloneMatrix,Recombinant CloneDetect以及XP media. 克隆形成

4 准确并且可靠筛选和挑取最优克隆 根据系统的分析和排列,用户筛选克隆 根据用户自定义参数筛选 和挑取克隆 铺细胞到半固体培养基 克隆培养 ClonePix对克隆进行 成像、分析、排列 ClonePix 挑取克隆

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14 天 易于挑取独立的克隆 ― 确保形成独立的单个克隆 ? 使用半固体培养基培养细胞 ? 适用于多种细胞,经过优化和验证的专用培养基可选:Per.C6?,CHO-s,CHO DG44,HEK,CHOK1SV, 杂交瘤以及骨髓瘤细胞等 ? 有标准成份,无动物源成份以及无谷氨酰胺成份等多种培养基可选 ? 使用CloneMatrix甲基纤维素浓缩液,用户自己配制特殊用途培养基 CloneMedia培养基获得的克隆, 使用CloneSelect Imager成像 不同于传统的培养方法,半固体培养基的细胞铺板密度 更高,并且可以保证形成独立的单个克隆,有利于下一 步单克隆的挑取. 使用CloneMedia-CHO培养 基无血清悬浮培养8天后,CHO 细胞克隆成像图片 使用CloneMedia Hybridomas /Myeloma培养基培养8天后, 杂交瘤克隆成像图片 www.MolecularDevices.com

5 使用半固体培养基培养细胞形成克隆,这种方法已经非常完善: EASIER TO PLATE OUT LARGE NUMBERS OF CELLS AND TO RECOVER MANY INDEPENDENT HYBRIDOMA CLONES A simple, single-step technique for selecting and cloning hybridomas for the production of monoclonal antibodies (J. Immun. Methods (1982) 50, 161-171) 使用基于荧光的方法检测分泌蛋白 ? 根据实验检测要求以及表达蛋白类型,选择合适的检测试剂,比如FITC标记抗人检测试剂 ? 加入液体检测试剂到半固体培养基 ? ClonePix系统对克隆进行成像、分析并根据所有克隆的荧光信号水平进行排序 使用荧光标记的CloneDetect原位检测人源抗体 检测方法的选择 检测分泌IgG的单克隆抗体 一个成熟的 培养方法 目标蛋白检测 Secreting clone CloneDetect added Secreted proteins form fluorescent precipitate 使用荧光耦联的抗原以及复合体起始因子(CIF)产生荧光复合体. 检测抗原特异性单克隆抗体杂交瘤 Secreted antibody (IgG) Complex Initiation Factor (CIF) Antigen (fluorescently conjugated or tagged) Secreting clone Fluorescent anti-tag Secreted tagged protein 构建的蛋白分子包含了标签序列,比如His,FLAG?或者Fc,可以使用 标签特异性的检测试剂检测. 检测加入标签分子的重组蛋白 荧光耦联的CloneDetect检测试剂可以原位检测分泌表达的人、小鼠以及大鼠抗体. 因为克隆本身不需要产生荧光,所以不需要对目标蛋白加入额外荧光标记分子. ClonePix?