PDF《ClonePix™ 2》

2 Higher secretors 高质量成像,智能化分析

6 成像 ? 白光和荧光成像可以用于计算克隆的大小以及荧光强度(代表目标蛋白的表达量). 数据显示 ? 软件根据克隆的荧光强度、大小等物理参数对克隆自动进行排序,得到所有克隆的2D柱状

图表. ? 克隆的筛选和选取主要依据以下参数: - 大小,边缘圆度以及克隆距离 - 根据荧光强度排序 - 用户可以通过软件中设置 proximity 的值,去掉距离太近的克隆 白光成像识别克隆,计算克隆的大小等参数. 荧光成像计算克隆荧光强度,筛选找到最优克隆. 克隆排序图 用户自定义筛选参数 ― 软件自动选取最优克隆 www.MolecularDevices.com Automatic selection of picking (can be manually overridden)

7 数据追踪 ? 软件自动将所有克隆的统计信息排列成表,可以随时导出想要克隆的信息 ? 软件按照用户自定义的顺序挑取克隆到96孔板,并自动记录克隆来源、位置信息以及荧光强度等统计学参数 所有克隆的统计学参数列表 最终克隆挑取结果信息 准确并温和挑取克隆 克隆挑取和转移 ? 用户可以根据成像数据和统计分析的结果自定义最终要挑取 的克隆数目和挑取顺序 ? 系统自动选择用户自定义的克隆,并将每个克隆转移到96孔 目标微孔板,用于培养后进一步分析或克隆扩大培养 ? For cell line expansion after picking, XP Media, fully compatible with semi-solid CloneMedia, supports optimal cell growth 转移挑到的克隆到 96孔目标板 Day

0 Day

2 Day

4 Day

6 克隆挑到96孔板之后,可以使用CloneSelectTM Imager对整块板每个孔的细胞生长情况进行成像跟踪分析(绿色表示的是软件识别到有细胞的区域,用于 自动计算细胞汇合度) ClonePix?

2 8 快速筛选特异性抗体克隆 ClonePix系统可以从融合后自动化筛选,一步找到目标杂交瘤克隆;

是一个高效的自动化筛选方法. ? 筛选更多克隆――发现更多的阳性克隆 ? 实验过程更加快速高效,e.g.7-10天可以筛选到100-500个特异性杂交瘤克隆 ? 通过避免阳性克隆的丢失以及早期排除阴性克隆,大大节省下游工作时间和成本 ? 原位筛选抗原特异性或者分泌IgG杂交瘤――适用于多种类型抗原分子( 从160 KD的复合体蛋白到2.6KD的磷酸肽) WE HAVE INCREASED OUR FUSION PRODUCTIVITY BY APPROXIMATELY 50%, WHILE DECREASING OUR TIME FROM FUSION TO STABLE CLONE BY 50% Dr. Robin Barbour, Prothena Corporation 快速检测抗原特异性IgG克隆 FITC标记60KD抗原 白光 荧光 抗原特异性IgG克隆 滤光片参数:激发光

470 +/- 25nm 发射光

535 +/- 25nm 快速从退化克隆中筛选高产克隆 退化细胞株亚克隆后,差异性非常大 高产克隆重新铺板后,克隆荧光 均一性较高 Clone selected for re-plating 一些杂交瘤细胞系在MAb的产量方面 退化严重,或者分泌性比较差.已有 用户使用ClonePix系统从退化的克隆 中成功恢复了高产克隆株. www.MolecularDevices.com

9 增加生物药物细胞系的产量 Conclusion from MedImmune: ... A POWERFUL TOOL IN CELL LINE DEVELOPMENT. THIS METHOD MAKES SELECTING THE OPTIMUM PRODUCERS FASTER AND LESS LABOR-INTENSIVE AND SHORTENS CELL LINE DEVELOPMENT TIME. Dr. Jianguo Yang, Group Leader in Cell Line Development, MedImmune LLC 更短时间筛选更多克隆 多孔板中 检测产量 14天后培养 于摇瓶中 ? 有限稀释 ? 利用ELISA筛选1000个克隆 (每孔1个细胞) 无血清培养 的母细胞 2个月 1个月 ? 筛选10 000个克隆 原位荧光显示高产细胞株,早期排除不需要的克隆 ClonePix