PDF《武汉大》

第15卷第1期2000年 3月中国病毒学V【ROLOGI CA S 【 N【 CA VD

1 .

1 5 No

1 M ar .

2000 S

2、 家 蚕核 型多角体 病毒 中国株 和 日本株 v p

3 9基因的比较 研究齐义鹏 ,刘德孙晓洁 (

5 I , ;

『 .

1 D ― 学病 毒430072)鼠7 ( 武汉大学病毒研究所.武汉L^/曩:以苜蓿 丫纹夜 蛾核 型多 角体病 毒(Ae NP V) 的棱衣壳 蛋 白基 因vp39设 计 引物 . 用PCR技 术扩增了家 蚕核 型多角体病 毒 中国株 ( B mN P V― Ch ) ~l

3 k b片段 , 并梗 I 定了其全 序列 长l230bp.推导 的氨 基酸351个. 其与 B r a nP V 目本株 ( B 珊NP V Ja ) v p

3 9基因棱苷 酸序 列 同源 性达卯.5%, 氨 基酸 同源 性选97.1%.该 片段 在EcoliBL21中诱 导表 达能产生 分子 量约为38kD的 特 征性 蛋 白带 . 证 明所 扩增片段为BmNP V- Ch的 9基 因 .经 与BmNP V- J a比较,其625位 有 3十 核哿酸(CGA) ,

9 8

5 ―9

1 0位有 6个 核昔 酸(GTC GG C) 的插入.未造成码组移动.有 l 7处点突变.但取代突变 ( r e p l a c e me n t mu t a t i o n ) 仅 7处 . 对两 株病 毒VP39蛋 白的 亲疏水性和酸碱 性 质未 产生显著影响. 由 于点 突变 带 来蘸 基酸 改变.使BmNP V― c h的vp39蛋 白的螺旋由132%增 加到15.4%, 无规 卷曲由7.2%减 少到

5 .

8 %. 折 叠和 转 角维 持 不变 . 约为796%. 仍 保持 以折叠为主 要二级结构单元的片层状折叠结构. V 砭关键调: 奎蠹蛋白基 目;

克强;

謇晕陆型垄苎签塞;

息兰婆;

二级结幸勾中田分 娄号 :Q7

5 3 文献橱i 识码:A \ 文章 编号 ;

1 0

0 3―5

1 2

5 (

2 0

0 0 )

0 1 ―0

0 5 2―0

7 杆状 病 毒的分子 生物学是 近来十分 活跃的研 究领域 之一 , 其模 型 种苜 蓿 丫纹夜 蛾 核型 多 角体 病毒( Au t o g r a l , h a c a l i f o r n i c a Nu c l e a r P o l y h e d r o s i s Vi r u s ,A P v) 的研究已取得 了重 大 进展 .

1 9

9 4年,Ay e r s 等人 …公布 了Ac NP V D NA

1 3

4 k b全 序列. 已鉴定 的重要基 因有

5 0多个, 包括核 衣壳蛋 白vp39基 因.1

3 1 i s s a r d等研究了黄 杉 毒蛾 核 型多 角体 病毒 ( O r g y i a p s e u . d o t s u g a t a N P V.O p NP V) v p

3 9基因的结构及 瞬时表达 .最近 的 研究发 现:Ae NP V 的vp39基 因与侵染密 切相关 .在侵 染过程中. VP

3 9蛋 白与 宿主的肌动 蛋 白结 合,使其重 排形 成缆索(e.able).导致细 胞骨架发 生变化 有利于病毒 编码 的蛋 白酶 的 水解 , 最后, 子代病 毒颗粒 大量 形成, 宿主 昆虫体全 部液化成 为脓 水J.可见 . v p

3 9基 因是 杆状病 毒 的一个 十分 重要 的基 因.由于家蚕 ( B o mb y z mo r i ) 表达 系统的独特优 点, 因此 , 家蚕 NP V( B l n N P v) 亦是研究 得 比较深 入的 一种 杆状病毒 .Ma e d a等_5】测定BmNP V 日本 株( BmNP V. J a ) 的基 因组 全 序列 .我 国学 者[

6 也有不 步关 于BmNP V 分子生物学 的报道 .他们使用的 毒株 多为从 日本 引进, 也有 从我国罹 病的家蚕 幼虫 中分离 .这两种地 理分 离物是 同一 毒株 , 还 是有 所差 别.未引起 任何 重视 . 本研 究克隆 表达了 B mNP V 中 国分离 物( B m NP V- C h ) 的vp39基因 . 并测定 了其全 序列 .经与 B mN P V - J a 比较 . 发 现它们的 序列和 结构有某些 差异, 但其 基本性质不变 .本研究结 果 不仅 对vp39基因 的研 究有重要 理论 意义 , 也为我 国病 毒资源 的开 发利 用提 出了新 的命题 . 收稿 日期 :