PDF《o E6细 胞诱导细胞 凋亡》

第18卷 6期2003年

1 2月中国病毒学VI R0L0GI CA S I NI CA

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3 De c e mb e r

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3 S A R S ― C o V 感染 V e r o E 6细 胞诱导细胞 凋亡 鄢然,沈超,雷磊,郑从义 ,肖庚 富,郭德银 ,朱应,鄢慧民料 ( 武汉大学 生命 科 学学 院 ,湖北 武汉 ,4

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2 ) S ARS - Co V I n f e c t i o n I n d u c e s Ap o p t o s i s o f Ve r o E6 YAN Ra n , S HE N Ch a o , L EI L e i , ZHENG Co n g ― y i , XI AO Ge n g ― f u , GUO De ― y i n , ZHU Ymg , Y AN Hu i 一―m―in料 ( C o l l e g e o fL i f e S c i e n c e s , W u h a n U n i v e r s i t y , Wu h a n

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7 2 , C h i n a ) Ab s t r a c t : T o d e t e r mi n e i f S AR S ― a s s o c i a t e d c o r o n a v i r u s ( S AR S ― C o V) i n d u c e s a p o p t o s i s .

we s t u d i e d t h e S ARS ― Co V i n f e c t e d V e r o E6 c e l l s b y a g a r o s e g e l e l e c t r o p h o r e s i s .i n d i r e c t f lu o r e s c e n t s t a i n i n g f o r i n f e c t i o n a n d Ho e c h s t

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8 s t a i n i n g f o r n u c l e i ,a s we l l a s b y f l o w c y t o me t r y .I t wa s f o u n d t h a t S ARS ― C0 V i n f e c t e d V e r o E

6 c e l l s s h o we d t y p i c a l a p o p t o s i s c h a r a c t e r is t i c s . Au t h e t y p i c a l a p o p t o t i c c e H s we r e i n l a t e ― i n f e c t i o n p e r i o d . Mo s t o f t h e c e l l s w i t h c y t o p a t hi c e f f e c t ( C P E )s h o we d n u c l e i wi t l l c o n d e n s e d c h r o ma t i n o r f r a g m e n t e d i n t o a p o p t o t i c b o d i e s . I t wa s s u g g e s t e d t ha t S ARS ― Co V i n f e c t i o n i n d u c e s a p o p t o s i s o f Ve r o E

6 . Ke y wo r d s : SARS ― Co V;

Ap o p t o s i s ;

Ve r o E6 摘要 :为 了确定 S AR S冠状病毒 ( S AR S ― C o V) 感染 V e r o E 6是否 引起细胞 凋亡 ,我们利用细胞 DN A 琼脂糖 电泳 , 感染 细胞的间接荧光染 色和 H o e c h s t

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8 细胞核 染色 , 以及流式细胞 仪分析等方法证 明了S AR S . C o V感染 的V e x o E 6具有典型 的凋亡细 胞学和生物化学特征 .实验证 明具有细胞凋亡特征 的所 有细胞均 为处于感染晚期 的细胞 .表现明显 细胞病变 ( C P E) 的细胞 大多 已经出现核质凝缩或 形成 凋亡 小体进入细胞凋亡 的过程 . 可 以断定 S A RS . C o V 感染 V e r oE 6细 胞诱发 了细胞凋亡 . 关键词 :S AR S冠状病毒 ;

细胞凋亡 ;

V e r o E 6细胞 中国分 类号:R3

7 3 文献标识码 :A 文章编号 :1

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0 3 细胞凋亡 ( Ap o p t o s i s )是一种不引起机体炎症 反应 的细胞程序性死亡 ( p r o g r a m me d c e l l d e a t h, P C D)过程 .病毒在感染细胞过程 中可诱导或抑制 寄主细胞发生细胞凋亡【l'

引.S AR S 冠状 病毒(SARS―associatedcoronavirus.SAR S ― Co V) 是 引起 严重急性呼吸道综合征的一种新型冠状病毒 ,主要 感染肺部组织 引起扩散性肺组织细胞损伤,并在肺 部组织 中 出现大量 的泡沫状 巨噬细胞和多核合胞 体3,钔.SARS ― C o V感染引起扩散性肺细胞损伤 ,是否与细胞凋亡过程有关尚不 明确.本 研究对SARS ― C o V感染的 V e r o E 6细胞进行了细胞凋亡特 征的分析测定,以初步了解 S AR S . Co V感染与细胞 凋亡的关系.

1 材料和 方法

1 .

1 材料 V e r o E 6细胞 由武汉大学中国典型培养物保藏 中心提供 .S A RS ― C o V为SAR S冠状病毒 WHU株(SARS . C o V WHU,原名 S AR S ― C o V l i B) , 从湖北输 入病人初期血清标本分离并鉴 引 ,病毒全基因组 序列号为 A Y3