编辑: kr9梯 | 2017-12-25 |
2 操作手册
一、开机 1.
确保仪器电源线连接正常;
2.打开电脑开关等待电脑启动完成;
3.打开仪器电源(仪器右侧开关) ,等待初始化(约1分钟) ;
4.打开电脑桌面 Maestro2.10.0 软件工作站,等待仪器初始化完成;
5.当工作站左下角硬件状态显示为 Ready 时,表示仪器初始化完 成;
6.长按 EXCITATION LAMP 键3秒开启激发光源,指示灯变亮表示激发 光源已经打开,可以进行下一步操作;
二、明场图片采集 1. 打开明场光源 可以通过两种途径打开:a 软件控制:工作站 Acquire 界面 下方 lighting 模块内在 Turn On Illumination 前面勾选 对号 ;
b 硬件控制:在仪器右侧控制面板内按 INTEROR ILLUMINATION 按钮,指示灯亮起为打开. 2.开启 Live 视野 工作站中点击 Live 按钮,就可以在屏幕上看到暗室内的实时 情况. 3.采集明场图片.根据 Live 视野,即屏幕上显示的实时情况对下 列参数进行调整: a 视野大小.在 Acquire 界面的 Binning And Region Of Interest 模块中点击 Max Sample Size 下拉菜单选择不同大小的视野.系 统默认为最大视野,即 3.3'
*4.4'
'
,当成像物体较小时,如成像某 个小鼠脏器,可以选择更小的视野;
b 曝光时间.调节 Wavelength And Exposure 模块中 Exposure (ms) 下面的数值大小来改变视野中成像物体的明暗;
c 对焦.调节 Focus 模块中 Focus 数值的大小可以实现视野中成 像物体的清晰程度. 在调节者三个参数后,视野中成像物体清晰可见,然后可以点 击 Acquire 界面最下面的 Acquire Mono 获得成像物体的明场 图片. 4.保存明场图片 点击采集得到的明场图片,窗口标题栏变为蓝色,然后点击 File>
Save Image>
Save (As Displayed)来保存图片,在图片类型中可选 JPG 格式和 Tiff 格式, 在图片名称中建议标注图片的内容和采集时间, 如 con-10_10 .
三、荧光信号采集 1.采集完明场图片后,进行荧光信号采集;
2.开启暗室内荧光激发光,同时关闭明场光源 可以通过软件和硬件两种方法开启:A 软件控制,在 Acquire 界面中 Lighting 模块 Open Shutter 前面勾选对号,同时在 Turn On Illumination 前面把对号去掉;
B 在仪器前面右侧控制面板中按下 SHUTTER 按钮,指示灯变亮说明荧光已开启,同时按下 INTEROR ILLUMINATION 按钮,使指示灯变暗. 3.选择合适的激发光波长 根据成像的荧光物质来选择合适的激发光波长,仪器可选蓝光 (435-480nm) 、绿光(503-548nm) 、黄光(576-621nm) 、橙光 (586-601nm) 、红光(616-661nm) 、深红光(641-681nm) 、近红外 光(684-729nm ) 七种激发光.可以通过 Acquire 界面中 Filter/Wavelength Selection 模块中下面较长的下拉窗口进行选择, 系统默认的是 blue(500:10:720) ;
4.采集成像物体的荧光信号 选择合适的激发光波长后,点击 Acquire 界面中 Wavelength And Exposure 模块内的 Autoexpose Cube 按钮,系统会对成像物 体进行自动曝光,返回一个合适的曝光时间,这个曝光时间数值会在 本模块中 Exposure(ms) 下方显示;
然后点击 Acquire 界面最 下方的 Acquire Cube 按钮,等待系统采集完整的荧光信号;
5.保存荧光信号文件 采集完成后会在窗口内获得一个 Cube 文件, 点击 File>
Save Cube 进行保存,建议输入 成像内容-激发光种类-曝光时间-采集时间 作 为文件名进行保存,例如 con-blue-100ms-10_10 ,文件类型建议选 择Image Cube.