PDF《两种方法冻存胎儿卵巢组织后的活力判断》

0. 05) . Two weeks after transplantation , numerous f ollicles were f ound in both groups and p rimordial f ollicles were widely dispersed in the stroma. Eight weeks after transplantation , the number of f ollicles in both groups was reduced , but the number of p rimary f ollicles was relatively increased. There were no significant differences in the survival rate of ovarian grafts , f ollicular density and serum E2 level between the two groups. Conclusion The viability of fetal ovarian tissue can be well p reserved by three2step rapid2f reezing method and there are no differences in morp hology and estrogen secretion of ovarian tissue after thawed , compared with the conventional slow f reezing method. KEY WORDS : fetus ;

ovary;

cryop reservation ;

transplantation 收稿日期 :2007211202 修回日期 :2008201207 基金项目 :国家自然科学基金资助项目(No. 30360112) 通讯作者 :王燕蓉 ,教授. E2mail :

4083304 @163. com 作者简介 :李跃萍(19772) ,女(汉族) ,博士 ,讲师. 研究方向 :生殖医学. E2mail : youth96 @163. com

3 期 李跃萍 ,邱曙东 ,王燕蓉 ,等. 两种方法冻存胎儿卵巢组织后的活力判断 卵巢早衰或病理性卵巢切除导致机体内分泌失 调 ,给女性的身心健康带来严重影响.针对这类患 者 ,采用激素替代疗法 (hormone replacement thera2 py , HR T) 进行药物治疗已应用多年.然而 ,有研究 显示 HRT 可增加女性罹患子宫内膜癌及乳腺癌的 风险性[123 ] ,这使其应用受到了限制.事实上 ,卵巢激 素并非只有雌激素、 孕激素和雄激素 ,还有许多生物 调节因子.卵巢移植可为机体提供均衡的生理所需 活性物质 ,从而缓解卵巢激素撤退引发的一系列疾 病.卵巢组织的冻存为卵巢移植提供了方便 ,然而异 体卵巢移植面临的供体器官严重短缺及排异反应成 为其应用中的主要障碍[4 ] .为了解决这些问题 ,研究 者们把目光投向了胚胎器官.胚胎卵巢作为供体有 以下几方面的优势 : ① 胚胎组织的抗原性较成体弱 , 可降低移植后的排异反应[5 ] ;

② 胚胎卵巢内含有大量 的原始卵泡使其比成体卵巢更耐受缺血、 缺氧过 程[6 ] ,适于冷冻与移植 ;

③ 近年来已有学者证实 ,冻存 可降低组织的免疫原性[7 ] . 鼠类与人类胚胎卵巢的冻存已有文献报道.但是,在冷冻方法上多采用慢速冻存法.该法虽然效果 稳定 ,但昂贵的冷冻设备使其不易在一些小型实验室 与生殖中心推广应用.因此 ,探索一种胎儿卵巢组织 的快速冻存方法将有助于卵巢组织库的建立.在前 期实验中 ,我们报道了快速冻存法能够有效地保存新 生大鼠的卵巢组织 ,在冻融移植后卵巢组织的免疫原 性被进一步降低[8] .但是 ,这种方法是否可应用于人 类胎儿卵巢组织的冻存 ? 冻融移植后胎儿卵巢组织 的发育与内分泌功能又如何 ? 文献关于这方面的报 道还很少.本研究的目的是比较常规慢速冻存法与 快速冻存法对解冻后胎儿卵巢组织的超微结构及移 植后组织生长活力的影响.

1 材料与方法 1.

1 材料来源及实验动物 本研究获宁夏医学伦理 委员会批准及母亲与家属的同意.取24 -

28 周引产 的胎儿

8 例 ,于娩出后无菌条件下即刻取出双侧卵 巢 ,经生理盐水洗涤后 ,置于预冷的含

200 mL/ L 小 牛血清的 PBS 中.体视镜下 ,去除卵巢髓质后将胎 儿卵 巢皮质分切成1mm3 大小的组织块备用. BALB/ c2nu/ nu 雌性裸鼠 ,品系合格证号 :医动字第