PDF《呼肠 孤病毒 内源 性转录 的结构 基础》

3 晶体2

5 A结构相继得到解析 ,研 究结果表明, R e o v i r u s 蛋白与其它病毒R NA聚台酶相类 似'

如n瓤萄体∞ 、H C V 等),为球状右旋式 自. 其N端及C 端精密围绕在手掌形 ( f i n g e ~ - p N m― t h u mb C O F e )、 I 结 构域周嗣 这样形成 r象笼了样的结构,引导 四 个通道通 向催化话性能点 位r3聚合酶表向的5 '

端帽化结合位点,暗示R NA 转求过程- I , 模板滞馏机 制:即模板R N A

5 端正诳与聚 台哺复合物结合仳进 了3 . 负链进入摸板通道的机会 在这网个通道 中, 中一个通道为入口.即'

条为s s R NA模板通道 , 一 条为N T P 供给通道 另外 个为释放出 口, d s R NA复制产物及正链R N A转录物的释放通道, 近期B a k e r 等成功将MR v

3 R NA聚合酶 晶体蛋 白结丰 勾 嵌入7

6 A MR Vf ~ 温电镜 与三维结构 重构密度 潜, 揭示 了每…

3 分 子锚定内衣壳表面,除与l { 个1分子产生主要的接触外, 与5 次轴 非t位点 复折 叠 由此说 明为什么仅一个 j 拷 贝与此位点桐琏. 并阐明在转采 复制过程 p

2 .

1 蚩自与 蛋白 ( R NA 聚合酶 )的相互作用方式

1 6

1 芷5 种核心结构蛋 白-+】,虽然还未获得u

2 的晶体结构,皿其纯化蛋白的 体外转录活 性分析结果表明

2 蛋白具有与

3 相日作用关系 , 推测u

2 在MR V核心具有酶括性 ,庄内源性R NA台成过辑 中具 有辅助 j 进 行转录 台战的 R N A5 . 三磷酸酶活性 '

I .

2 呼肠孤病毒转录与调节的结构基础 业 已证实,MR V呼肠孤病毒核心 少催. t

4 :

5 种 小同的酶活性反应 , 除丁

3 蛋n其商R NA聚台酶活 性外 ,臣5 '

mR NA帽 化过程中迷 钶4 种酶 参与反 应,即R N A5 '

三磷酸酶( R T P a m) 、R N A

7 - N 一 呜核 片酸 转移酶、 R N A7 N . 鸟坎1 _ = j : 酸q l 基化酶r Me t h y l w a n s f e r a s e

1 ) 和R N A

2 '

- O一 桉精 甲基化酶 ( Me t h l t l a n s f e r a s e 2) R T P a s e 活性已定位于 l 蛋白, 塔J 突2篮自禽肯 R N A 鸟营酸转移酶 与甲基化脯活性 I ,其功能 维普资讯 http://www.cqvip.com 方勤,等. 呼肠孤病毒 内源性转录的 结构基础 为完 成新生的mR NA转录产物的帽化 反 应及 为mR NA提供输 出通道.早期研究 已证实,病毒核心 还具有催化从NT P 去除1 L - 磷酸基团的反应. MR V的转录与复制首先 由脱壳而激活 J , 然后 进行s s R NA的转录 , 整个过程在亚病毒颗粒 中进行 , 由病毒核心所携 带的R NA聚合酶和 其它复制酶 共 同完成.在病毒核心内,由亲代d s R NA负链转录产 生的正链R N A是复~ I J d s R N A的负链 的模板 , 合成 自 单一位点起始,以5 '

.

3 '

方 向进行 ,负链合成一旦完 成,便与正链结合形成子代双链R NA.复制酶依赖 负链模板合成正链mRNA,通过亚病毒颗粒 的2蛋白通 道上 的帽化结 构域进行 加帽 反应….帽化 mRNA产物一方面可作为正链与负链结合用于基 因 组包装 ,另一方面运送到细胞质 中,在聚核糖体上 翻译产生不同的蛋白质 .在MR VR NA转录与帽化 过程 中,R D R P 的催化复合物结构特征与 已知结构 的 其它R N A 聚合酶结构特性十分相似I

2 .为保证呼 肠孤病毒拥挤 的核衣壳 内部 ( 包括基 因组R NA)时 空上 的协 调性 ,九3聚合酶结构 呈现 明显 的进 化特 征.MRV ~

3 的2 .

5 A分辨率晶体结构显示,R NA聚 合酶催化位 点位于连接4 个通道 的笼子 中心 ,有一 个 向外 的位 点用于5 '