PDF《呼肠 孤病毒 内源 性转录 的结构 基础》

. m R NA帽化反应 以限定聚合 酶的活动范 围( 图2 ) .R DP R在d s R NA病毒蛋白中具 有高度保守性 ,对 正链或负链R N A病毒而言,也拥 有基本相 同的折叠 ,如丙型肝 炎病毒 ( He p a t i t i s C v i r u s ,HC V)R NA聚合酶等 引.图2多核苷 酸合成 的空间结构模 型(引自文献 ) F i g .

2 M o d e l f o r s p a t i a l o r g a n i z a t i o n o f p o l y n u c l e o t i d e s y n t h e s i s ( f r o m r e f e r e n c e [ ~

5 1 ) 为进一 步揭示转录酶 同底物R NA / 产物mR NA 相互作用方式 , X i a 等通过对C P V完整的与空的衣壳 的l

3 A 分辨率密度 图谱分析 ,获得 了病毒颗粒中心 高度螺 旋的d s R NA与 内衣壳位 点转录酶 蛋 白形成 的锥型环绕转录酶复合物( T E C ) 模型 ,提 出了R N A 复制与转录过程的模板移动机制I

2 】 .早期 的生物化 学与结构研究认为,d s R N A 模板在T E C 作用下转录 获得新生的mR NA,然后通过T P 塔式突起蛋白加帽 后运送到 寄主细胞质 .Xi a 等获得C P V新的结构信 息 ,勾画 了在活性转录中允许 内部基 因组排序 的详 细 的逐级转录机制 .在静态时 ,R NA基因组负链 的3'

与T E C 接触形成转录起始复合物 ;

转录一旦开始 , 位于 衣壳 蛋 白上 的解 旋酶 结构域解 开d s R NA两条 链 ,这样负链R NA得 以插入T E C内小的R NA结合缝 隙, 在位于R NA聚合酶附近 的R NA结合结构域负链 与正链汇合形成二聚物 .在延伸处理过程 中,T E C 提供 了结 构框 架 引导新形 成的d s R NA产物 向衣壳 中心域帽化酶连接,接着新合成 的mR NA通过T P 塔 式突起释放 .这一机制为d s R NA病毒高效有序的内 源性R N A转录提供了依据 . 基于C P V单一衣壳结构的特殊性,Z h o u 等通过 对C P V

8 A 分辨率低温电镜与三维构像 图谱 的分析, 阐明了C P V结构的稳定性与mR NA转录调节的结构 基础 .研究发现 ,在每一个CP V衣壳上 的1

2 0 个L P P 将 内部二聚体界面与交互二聚体界面邻近 的C S P 完 全锁住 .L P P间及 内层C S P 间的相互 作用 ,与更广 泛的T P―CS P 相互 作用 结合在一起 ,这样 加强 了CPV的稳定性 ( 图1 ) .基于上述结构特征 ,与其它 相对 多孔 的呼肠孤病 毒衣壳 结构不 同的是 ,仅在 C P V T P 突起下面 ,有一个既能关闭又能开启的小 孔 .在C P V颗粒处于静止状态 时,孔是关 闭的.在mR NA释放 时,通过构像的改变打开小孔.C P V衣 壳蛋 白分子 间特有 的相互作用 形式 ( 如 多化合价 的,易变 的及混杂 的特性 ) ,可 能有 助于转录合成 过程 中衣壳蛋白构像改变的需要 .这一发现 ,提供 了一个在 内源 性R NA转录 过程 中促进 构像转换及 调节R NA合成与释放的机制.基于对C P V核蛋 白结 构基础及与R NA相互作用的关系 的揭示, Z h o u 等提 出高度有序 的R NA转录 、合成及释放过程 的调节 , 是通过光 圈样收缩有序化开启或关 闭5 次对称轴上 一层衣壳小 孔及二层 塔式突起通 道上功 能结构域 得 以完成的I J _ j '

J .这一假说与其它呼肠孤病毒转录 与合成机制相类似,但需要进一步的实验依据 .

3 病毒结构与进化的关 系 基因组序列的同源性分析表 明,呼肠孤病 毒科 现有 9个属 的成员在系统进化上存在显著的分歧, 维普资讯 http://www.cqvip.com

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8 中国病毒学第l9卷 但它们在病毒结构上拥有很多共性:1 )病毒粒子 无包膜;