PDF《马来酸噻吗洛尔眼用凝胶剂 的含量测定及药效研究》

2 g ,甘油

2 g ,水98 g. 制备工艺 :羟丙基甲基纤维素 K4M 用水浸泡 , 自然溶胀 ;

热水将适量尼泊金乙酯溶解 ;

按处方量依 次将 ED TA22Na 、 亚硫酸钠、 甘油、 尼泊金乙酯溶液 武汉大学学报(理学版) 第51 卷 加入到羟丙基甲基纤维素 K4M 的水溶液中 ,补加 水至所需量 ,搅拌均匀 ,即得到马来酸噻吗洛尔眼用 凝胶剂. 1.

3 分析方法 1. 3.

1 样品的制备 ①专属性实验样品的制备. 分别用盐酸、 氢氧 化钠和双氧水对凝胶剂进行破坏处理 ,得到杂质和 降解产物. 按处方比例称取除主药外的其他成分 ,制 成空白基质. 处理后的凝胶剂和空白基质用流动相 溶解. ②对照品溶液的制备. 精密称取经

105 ℃ 恒重 的马来酸噻吗洛尔对照品适量(相当于噻吗洛尔0.

1 g) ,置于

100 mL 容量瓶中 ,用蒸馏水定容 ,作为储 备液. 临用时 ,取所需量置于容量瓶中 ,用流动相定 容 ,得到浓度依次为

20 ,40 ,60 ,80 ,100 mg・ L -

1 的对 照品溶液. ③凝胶剂溶液的制备. 精密称取凝胶剂

500 mg 于50 mL 容量瓶中 ,加入少量流动相后剧烈震 荡使凝胶充分溶解 ,用流动相定容 ,水浴超声

15 min ,即得. 1. 3.

2 流动相的优化 按色谱柱 Diamonsil C18 (4.

6 mm *

250 mm ,5 μm) 、 流动相流速 1.

0 mL・ min-

1 、 柱温

30 ℃、 进样 量20μL 、 检测波长

295 nm ,采用不同比例的流动 相 ,考察专属性实验样品中噻吗洛尔与杂质和降解 产物的分离效果及辅料的出峰情况. 1. 3.

3 实验步骤 在优化的色谱条件下 ,依次进行线性、 精密度、 稳定性、 回收率、 含量测定等实验. 1.

4 药效实验 动物实验方法 :用眼压计测量家兔的眼压 ,每次 测量前需用

1 %地卡因对眼进行局部麻醉. 取家兔

5 只. 测量眼压 ,记为原始眼压. 滴一滴 马来酸噻吗洛尔凝胶剂 ,依次在

1 ,2 ,3 ,4 ,5 h 后测 量家兔的眼压 ,每组测量

3 次 ,求平均值. 饲养

4 d ,用0.

5 %马来酸噻吗洛尔滴眼液进行 给药 ,其余步骤同上 ,作为对照. 比较马来酸噻吗洛 尔凝胶剂和马来酸噻吗洛尔滴眼液的药效差别.

2 结果与讨论 2.

1 流动相的优化 通过对色谱条件的研究 ,发现色谱条件以甲醇2 H2 O2三乙胺(体积比 50∶ 50∶ 0.

1 ,磷酸调节 p H 值到 5. 0) 为流动相时 ,噻吗洛尔出峰时间适中 ,且与其他 物质分离效果较好 ,此时辅料对噻吗洛尔的测量也 无干扰. 在此条件下 ,专属性实验样品的出峰情况见 图1. 图1专属性实验样品的色谱图 (a) ~(d) 分别为碱破坏实验、 酸破坏实验、 氧化破坏实验、 辅料干扰实验 峰1:马来酸峰 ;

峰2:噻吗洛尔峰 ;

峰3~5 :杂质和降解产物峰

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2 第S2 期 彭俊清 等 :马来酸噻吗洛尔眼用凝胶剂的含量测定及药效研究 2.

2 线性考察 取对照品溶液各

20 μL 注入高效液相色谱仪 中 ,以噻吗洛尔峰面积对其浓度进行线性回归计算 , 得到回归拟合方程和相关系数为 : A =

417 648 c -

235 272 , r = 0.

999 5 式中 A :噻吗洛尔峰面积 , c/ mg・ L -

1 :噻吗洛尔浓度 值,r:相关系数. 结果表明 ,在20~100 mg・ L -

1 范围 内 ,噻吗洛尔峰面积与浓度的线性关系良好. 2.

3 精密度考察 取60 mg・ L -

1 的对照品溶液 ,重复进样

6 次 ,噻 吗洛尔峰面积的相对标准偏差 ( RSD) 为0.

87 % ( n = 6) ,表明该方法有较好的重现性. 2.