编辑: 棉鞋 2019-07-03

2000 rpm*10 min,弃上清.如此重复固定三次. 滴片:用固定液将沉淀调成细胞悬液(视细胞量而 定,不宜太浓,一般加固定液至0.5 ml左右),在冰片 上滴片,每张片上滴2~3滴. 烤片:立即放入75 ℃烤箱中烤片3 h左右. 5.显带:先将玻片放在预温至37℃的0.025%胰酶溶液 中(PH=7.2~7.4)消化0.5~2 min左右,每次作用时间并 不完全相同.可先尝试在本实验室条件下进行摸索,再 根据显带效果调整胰酶作用时间,再放在预温至37 ℃ 的0.85%生理盐水中漂洗两次,在预温至37℃的Giemsa溶液中染色1~2min,自来水冲洗干净,用吹风机 吹干后,即可阅片. 【产品通用名】 淋巴细胞培养液 【产品备案名】 淋巴细胞保存液 【产品规格】 5ml/支25支/盒 【组成成分】 RPMI1640 牛血清 青-链霉素 植物血凝素 (PHA) 等 【保质期限】 2~8℃条件下 3个月;

-20℃条件下 8个月 【生产日期】 见瓶上标签 【 医疗器械生产企业备案编号】 豫食药监械生产备20140010号 【医疗器械备案 号】 豫郑械备 20140003号 【产品技术要求编 号】 豫郑械备 20140003号 【预期用途】淋巴细胞培养液专用于人外周血淋巴细胞 培养及进行染色体核型分析.本培养液仅适用于人体外 诊断,不能用于治疗用途. 【使用方法】 1.采血:用10:2肝素(10%)温润无菌注射器或肝素钠 抗凝采血管抽取外周血2 ml(注意:消毒时需脱碘). 注:采集的外周血若立即接种则无需加肝素抗凝, 如需保存标本,应加肝素抗凝;

采集的外周血在冰箱

4 ℃保存,保存期不能超过一周. 2.种血:将注射器搓捏,使血样混匀,在无菌条件 # 下,用7 针头垂直种血24~30滴(约300 ul)至外周血培 养液内. 注:种血前请把淋巴细胞培养液复温至 37℃. 3.培养:将培养液倾斜放置于37 ℃恒温箱中培养68 h~72 h,培养期间注意观察培养液有无凝血、溶血或长 菌的现象,可每天将培养液轻轻摇晃使细胞重悬,以便 细胞获得充分的营养,一般情况下可不摇. 4.制片: 加秋水仙素:在培养完成前1 h~2 h,加入浓度为

20 # ug/ml 的秋水仙素 1~2滴(7 针头竖滴)后,继续培养1 h~2 h左右. 离心:将培养液轻摇混匀,放入水平离心机中,

2000 rpm*10 min,弃上清. 低渗:加入已预温至37 ℃的0.075 mol/L氯化钾溶液

5 ml,用吸管充分吹打均匀,放入37 ℃水浴箱中,........

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