PDF《杜仲成熟胚器官发生途径的研究》

15 ~

20 分钟.培养条件:光照强度

2 500 LX,光照 时间

15 h/d.培养温度为(25±2)℃.

2 结果与讨论 2.1 成熟胚初代培养 成熟胚初代培养基1个月后, 成熟胚生长情况、 芽诱导和愈伤组织诱导情况见下表 1. 表1杜仲成熟胚初代培养生长情况统计 Table

1 Growth state of Eucommia bark mature embryo in primary culture? 标号 BA /(mg・L-1 ) NAA /(mg・L-1 ) 成熟胚的生长情况 愈伤组织 诱导率 /% 芽的诱 导率 /%

1 0.5 ― 部分形成芽,生长正常;

个别形成愈伤,褐化严重

10 40

2 1.0 ― 大部分形成芽, 生长正常;

个别形成愈伤,部分褐化

20 70

3 2.0 ― 部分形成芽,叶片卷 曲;

未形成愈伤组织

0 40

4 ― 2.5 部分形成芽,生长正 常;

未形成愈伤组织

0 50

5 0.5 0.1 大部分形成芽,生长正 常;

未形成愈伤组织

0 80

6 0.5 0.5 部分形成芽,生长正 常;

未形成愈伤组织

0 30

7 0.5 2.5 部分形成芽,生长正 常;

未形成愈伤组织

0 40

8 1.0 0.1 部分形成芽,生长正 常;

未形成愈伤组织

0 40

9 1.0 0.5 未形成芽;

个别形 成愈伤,生长正常

20 0

10 1.0 2.5 部分形成芽,生长正 常;

未形成愈伤组织

0 30

11 2.0 0.1 个别形成芽,叶片卷曲;

部分形成愈伤,生长正常

40 10

12 2.0 0.5 未形成芽;

大部分形 成愈伤,生长正常

60 0

13 2.0 2.5 未形成芽;

个别形 成愈伤,生长正常

70 0

14 ― ― 生长缓慢,未形成 芽;

未形成愈伤

0 0 由表

1 可以看出,杜仲成熟胚在芽的诱导需要

81 第33 卷中南林业科技大学学报有激素的参与,在无激素培养基中,胚生长发育明 显缓慢,未形成芽.单独使用 BA 时,在BA(1.0 mg/L) 的培养基中芽诱导率最高为 70%,过高浓度 的BA(2.0 mg/L)会影响成熟胚的生长发育,使 其不能形成正常芽,叶片卷曲,且芽的诱导率也 只有 40%.单独使用 NAA 时,也有芽的产生,在NAA(2.5 mg/L)的培养基中,芽诱导率 50%. BA 和NAA 共同使用时,以BA(0.5 mg/L) +NAA(0.1 mg/L)的诱导率最高达到 80%,可见 低浓度的 BA 和NAA 搭配使用有利于芽的诱导, 并且芽生长正常;

随着 BA 浓度的提高,芽诱导 率逐渐降低,当BA 浓度达到 2.0 mg/L,三个配 方只形成了一个芽且生长不正常叶片卷曲.由此 可见,最适合芽诱导培养基为:MS+BA(0.5 mg/L) +NAA(0.1 mg/L),见图 1. 2.2 芽的增殖 在初代培养基中诱导的芽都是单个芽,将初 代培养萌发出的未染菌的芽继代到与各自初代培 养基配方相同的培养基上(配方标号延用初代培 养的标号),培养

1 个月后,观察记录丛生芽的 生长状况,诱导率和增殖系数,结果见表 2. 表2丛生芽诱导生长情况 Table

2 Growth state of adventitious buds induction 标号 BA /(mg・L-1 ) NAA /(mg・L-1 ) 丛生芽生长情况 丛生芽诱 导率 /% 丛生芽增殖系 数/( 个/芽)10.5 ― 部分形成丛生 芽,生长正常

30 2±1.73

2 1.0 ― 部分形成丛生 芽,生长正常

40 3±1.41

3 2.0 ― 大部分形成丛生 芽,生长正常

60 3±0.89

4 ― 2.5 未形成丛生芽

0 0

5 0.5 0.1 个别形成丛生 芽,叶片卷曲

20 2±1.41

6 0.5 0.5 个别形成丛生 芽,叶片卷曲

20 2±0

7 0.5 2.5 未形成丛生芽

0 0

8 1.0 0.1 未形成丛生芽

0 0

10 1.0 2.5 未形成丛生芽

0 0

11 2.0 0.1 部分形成丛生 芽,叶片卷曲

50 2±1.41 由表

2 可以看出,杜仲芽增殖需要 BA 或BA 和NAA 同时存在,只添加 NAA 不能诱导出丛生 芽;