PDF《致畸试验》

95 %(V/V)乙醇中固定

2 周~3 周,取 出胎仔(或可去皮、去内脏及脂肪)流水冲洗数分钟后放入

10 g/L~20 g/L 的氢氧化钾溶液内 (至少

5 倍于胎仔体积)8 h~72 h,透明后放入茜素红应用液中染色

6 h~48 h,并轻摇 1~2 次/d,至头骨染红为宜.再放入透明液 A 中1d~2 d,放入透明液 B 中2d~3 d,待骨骼染红 而软组织基本褪色后,可将标本放在甘油中保存. 骨骼标本制作方法二(剥皮法) :也可将胎鼠剥皮、去内脏及脂肪后,放入茜素红溶液染 色,当天摇动玻璃瓶 2~3 次,待骨骼染成红色时为止.将胎鼠放入透明液 A 中1d~2 d,换 到透明液 B 中2d~3 d.待胎鼠骨骼已染红,而软组织的紫红色基本褪色后,可将标本放在甘 油中保存. 胎鼠骨骼检查:将标本放入小平皿中,用透射光源,在体视显微镜下作整体观察,然后

5 逐步检查骨骼.测量囟门大小,矢状缝的宽度,头顶间骨及后头骨缺损情况,然后检查胸骨 的数目,缺失或融合(胸骨为

6 个,骨化不全时首先缺第

5 胸骨、次为缺第

2 胸骨) .肋骨通 常12~13 对,常见畸形有融合肋、分叉肋、波状肋、短肋、多肋(常见

14 肋) 、缺肋、肋骨 中断.脊柱发育和椎体数目(颈椎

7 个,胸椎 12~13 个,腰椎 5~6 个,底椎

4 个,尾椎 3~

5 个) ,有无融合、纵裂等.最后检查四肢骨.致畸试验胎鼠骨骼检查项目见表 2. 表2致畸试验胎鼠骨骼检查项目 部位 检查项目 枕骨 骨化中心缺失 脊柱骨 数目、形状异常、融合、纵裂、部分裂开、骨化中心缺失、缩窄、脱离 盆骨 骨化中心缺失、形状异常、融合、裂开、缩窄、脱离 四肢骨 数目、形状异常 腕骨 骨化中心缺失 掌骨 形状异常 趾骨 形状异常 肋骨 数目、形状异常、融合、分叉、缺损 胸骨 数目、融合、骨化中心缺失 4.5.6 胎鼠内脏检查 每窝的 1/2 活胎鼠放入 Bouins 液中,固定两周后作内脏检查.先用自来水冲去固定液, 将鼠仰放在石蜡板上,剪去四肢和尾,用刀片从头部横切或纵切

5 刀.按不同部位的断面观 察器官的大小、形状和相对位置.正常切面见图. (1) 经口从舌与两口角向枕部横切(切面①) ,观察大脑、间脑、小脑、舌及颚裂. (2) 在眼前面作垂直纵切(切面②) ,可观察鼻部.

6 (3) 从头部垂直通过眼球中央作纵切(切面③) ,可观察眼部. (4) 沿头部最大横位处穿过作切面(切面④) ,可观察脑室部. 以上切面的目的可分别观察舌裂、双叉舌、颚裂、眼球畸形、鼻畸形,脑和脑室异常. (5) 沿下颚水平通过颈部中部作横切(切面⑤),可观察气管、食管和延脑或脊髓. 以后自腹中线剪开胸、腹腔,依次检查心、肺、横膈膜、肝、胃、肠等脏器的大小、位置,查毕将其摘除,再检查肾脏、输尿管、膀胱、子宫或睾丸位置及发育情况.然后将肾脏 切开,观察有........