编辑: AA003 2019-07-11

2 2

0 ( P z P L ) 含有不同启动子的表达载体 p K K

2 2

3 ―

3 ( P t a c ) 和(pGEX一

4 T一1 ( P t a c ) 重新构建汉滩病毒 GI 和G2的表达质粒, 期望能够提高 G

1 和G2的表达水平, 实验结果证实 用pKK

2 2 3―3和pGZ X一4 T―l 构建的 Gl和G2表达质粒不能明显提高 Gl 和G2的表达水 平.在这种情况 下, 我们分析 了GI和G2编码 区基因密码子, 发现 GI和G2中含 有大量大肠 杆菌的稀有密码子, 稀有密码子越多. 外源蛋 白在大肠杆菌中的表达水平越低.我们想通过缺 失突变 的方法表达部分 G1 和G2的多肽, 也许多肽的表达量较高 ;

同时还 可研究 G1和'

G 2的 缺失突变体 的免疫原性等特性 .故利阳 内切酶分别构建了 G I 和G2的缺失突变体表达质粒. 它们分别含有 G1编码区基因的

5 末端

1 2

3 4个碱基和 G 2编码 区基 因的

5 末端 的665个碱 基. 实验结果证 实它们的表达量较完整 G1和G2无 明显提高. 因为用这两种表达 质粒表达 的 多肽免疫小 鼠后. 小鼠产生抗汉滩病毒抗体的滴度无 明显升高. S c l ma a l j o h n l

4 J 和石晓宏 分别用重组痘苗病毒和杆状病 毒成功地表达 了汉滩病毒的 G1 和G2蛋 白. 但表达水平都较低, 表达的 G1和G2免疫小 鼠所诱导产生的抗汉滩病毒抗体 的滴 度都低于本研究的结果, 综合上述结果, 我们认为要高 技表达汉滩病 毒囊膜糖蛋 白GI和G2很难在大肠杆菌中高技表达. 要高效表达汉滩病毒 的GI 和G2糖蛋白. 可能需要对它 们的编 码基 因进行 一定的改造. 维普资讯 http://www.cqvip.com 中国府毒学第l2卷 参考文献1黄长形. 持为梧. 抗长寿等. 在太西杆茸中分别表选没滩病毒曩奠糖叠白G l 和G

2 . 中国囊毒拳.

1 9

9 7 .

1 2 (

4 ) :

3 1

3 {

3 2

1 2 黄长形. 李光玉. 栖为梧等. 原壤绷胞表达的肾综音征出血热鼙鞭叠 白~ t U * t 和免瘦保护作用的研究. 中国囊毒学,

1 9

9 5 .

1 1 (

3 ) :

2 2

5 -2

2 9 一,

3 隋广超. '

胡美带. 髟响 太西杆茸中外 再基因寰选的因素 生钧耙拳秘生静蝣曩潦晨.

1 9

9 4 ,

2 1 (

2 ) : I

2 8 -

1 3

2 4 s c b r } D h c S . c h u YK.S c h ma l j o h n A L .

1 j :;

c 西I h } h 嚏岫 Vi n 4一嘲州.u―dbaeulovims a n d v n c c l n l a .v i r u s r e mmb i n a n m. J Vi r d.

1 9

9 0.

6 4 (

7 ) {

3 t

6 2―3

1 7

0 5 石晦宏. 謇干. 杭长寿等. 重组轩救窟毒表达没坦病毒结构蛋白在宴礁动糖巾的免在应替. 中单缸生糟学和免疫拳 意.

1 9

9 5 . t

5 (

4 ) :

2 3

8 ―2

4 I Exp r e s s i o n o f Ha nt a a n Vi r u s Env e l o p e Gl y c o pr ot e i ns G1 a nd G2 i n E . c o l i wi t h Di f f e r e n t i a l Ex pr e s s i o n Ve c t o r Hu a n g C h a n g x i n g Ya n gW e i s o n g Ha n gCh a n g s h o u e t a l ( T a n g d u l - ~p i t a t . T h eF o u r t h 把r y 抽u岍竭,.x1^71~3

8 ) i : . '

: F o r i n c r e a s i n g t t I _ e e x p r e s s i o n l e v e l

0 f H a 幛rtls~v e l o p e g l y c o p '

r o t e i n s G I a n d G

2 i n E. c o / / . t h e e x p r e s s i o n v e c t o r p KK2

2 3一andpGE) c一4 T ―1we r eu s e df

0 c o ~t r u c t i n gGl a I l dGl e x p r e s s i o n p l a s m| 山, E X二 4T―l af u ~ o n -p r o t e i n e x p r e s ~ g n v e c t o r p h s mi d . r e s u ~ s h o w e d t h a t t h e 螂O.nlsofFumt ~n . v i r u s e n v do ~ ........

下载(注:源文件不在本站服务器,都将跳转到源网站下载)
备用下载
发帖评论
相关话题
发布一个新话题