PDF《第27 号标准：诊断规程 DP 6:》

本诊断规程由标准委员会代表植物检疫措施委员会于

2014 年8月通过.

本附件是 ISPM 27:2006 标准规定的一部分. 《国际植物保护公约》 DP 6-1 ISPM

27 附件

6 国际植物检疫措施标准 第27 号标准:诊断规程 DP 6: 柑橘溃疡病菌(Xanthomonas citri subsp. citri) (2014 年) 目录 1. 有害生物信息

2 2. 分类信息

2 3. 检测.3 3.1 有症状植株的检测

3 3.1.1 症状

3 3.1.2 分离

4 3.1.3 血清学检测:间接免疫荧光法.4 3.1.4 分子检测.5 3.1.4.1 分子检测的对照.5 3.1.4.2 从受侵染的柑橘组织中提取 DNA.6 3.1.4.3 常规 PCR

6 3.1.4.4 实时 PCR

7 3.1.5 常规与实时 PCR 结果的解读.8 3.1.6 通过生测进行检测

9 3.1.6.1 叶牒接种检测

9 3.1.6.2 离体叶片富集

9 3.2 无症状植物的检测

9 4. 鉴定.10 4.1 PCR 法.10 4.2 血清学检测

12 4.2.1 双抗体夹心法 ELISA.12 DP 6:2014 限定性有害生物诊断规程 DP 6-2 《国际植物保护公约》 4.2.2 间接 ELISA.13 4.3 致病性检测

13 4.4 描述与生化特征.13 4.5 分子鉴定.14 4.5.1 多位点序列分析.14 4.5.2 Rep-PCR 指纹分析…14 5. 记录.15 6. 获取进一步信息的联系点.15 7. 致谢.16 8. 参考文献

16 9. 图20 1. 有害生物信息 柑橘溃疡病菌(Xanthomonas citri subsp. Citri)是柑橘溃疡病的主要致病因 子.它对在亚洲、南美洲、大洋洲和非洲很多国家,以及美国佛罗里达州广泛存在 的热带和亚热带条件下种植的(CABI,2006:EPPO,2006),以柑橘属(Citrus spp.)、金橘属(Fortunella spp.)和枳属(Poncirus spp.)为主的很多芸香科 (Rutaceae)栽培种造成危害(EPPO,1979).一些寄主范围有限的非典型柑橘溃 疡病菌菌株已被 鉴 定并命名为菌株 A* 和Aw (Sun 等,2004 ;

Vernière 等, 1998).菌株 A*自然条件下在亚洲危害墨西哥莱檬(Citrus aurantiifolia).菌株 Aw 自然条件下在美国佛罗里达引起墨西哥莱檬和大叶莱檬(Citrus macrophylla)溃疡(Cubero 和Graham,2002,2004).均有报道称这两个菌株在实验条件下会在 其他柑橘种类上引起非典型病变(Escalon 等,2013). 在多数柑橘种植区,柑橘溃疡病一般发生在感病寄主的苗木、幼树和成年树 上,这些寄主从夏末到秋天都有大量旺盛生长的嫩枝和叶片.感病寄主的叶片、嫩梢、细枝和果实上形成溃疡病斑.风、刺、昆虫,以及物理或机械伤害造成的伤口 会加重成熟组织的侵染.柑橘潜叶蛾(Phyllocnistis citrella)的为害会提高叶片对 柑橘溃疡病的感病性(Hall 等,2010). 柑橘溃疡病菌可以作为寄主或非寄主植物的表生菌在病变组织中存活,也可以 作为腐生菌在稻草覆盖物或土壤中生存.然而,越冬病斑,尤其是在嫩梢上形成的 病斑是下一季最重要的侵染源.近距离扩散的主要机制是风雨和植株内、植株间的 飞溅的水花:细菌随流经病斑表面的雨水传播,并飞溅到健康枝梢上(CABI, 2006).染病植物材料,包括接穗、砧木苗和带梢植株的运输与远距离扩散密切相 关.没有证据显示该病菌能种传(CABI,2006). 2. 分类信息 学名: Xanthomonas citri subsp. citri (Gabriel 等,1989) Schaad 等,2007 异名: Xanthomonas smithii subsp. citri Gabriel 等,1989,Schaad 等,

2007 Xanthomonas axonopodis pv. citri (Hasse) Vauterin 等,1995 Xanthomonas citri (ex Hasse, 1915) Gabriel 等,1989 限定有害生物诊断规程 DP 6:2014 《国际植物保护公约》 DP 6-3 Xanthomonas campestris pv. aurantifolii Gabriel 等,1989 Xanthomonas campestris pv. citri (Hasse) Dye,1978 Xanthomonas citri f.sp. aurantifoliae Namekata and Oliveira,1972 Pseudomonas citri Hasse,1915 分类地位: 细菌域,变形菌门,γ-变形菌纲,黄单胞菌目、黄单胞菌科 通用名: 柑橘溃疡病,柑橘细菌性溃疡病、亚洲溃疡病 注:柑橘溃疡病菌是最近从地毯草黄单胞菌柑橘致病变种(X. axonopodis pv. citri)(野油菜黄单胞菌柑橘致病变种 A 菌系(X. campestris pv. citri group A strains))重新分类确定的.Gabriel 等(1989)的命名法被再次提起,现在柑橘溃疡 病病原的接受名是柑橘黄单胞菌柑橘亚种(X. citri subsp. Citri)(Bull 等,2010;