PPT《TOCSY》

相敏COSY:采集512个FID, 零填充后谱由2K?2K个实数点组成;

DQF-COSY:采集512个FID, 零填充后谱由2K?2K个实数点组成;

TOCSY : 采集256个FID, 零填充后谱由1K?1K个实数点组成,?=15ms?75ms;

NOESY :采集256个FID, 零填充后谱由1K?1K个实数点组成, ?=150ms?250ms;

ROESY :采集256个FID, 零填充后谱由1K?1K个实数点组成,?=150ms?250ms;

以上数据适合于分子量小于10000的分子的实验.从中可看出,由于相敏COSY和DQF-COSY的交叉峰是反相的,为了防止正负对消,因而所用数据集较大. 同核相关谱实验设置 生物大分子波谱学原理吴季辉 在进行这些2D实验时,接收机的增益 (receiver gain) 的设置值得注意.对于这三种COSY实验(幅度COSY,相敏COSY,DQF-COSY),由于它们的FID信号是调制的.因次,前面的一些FID的信号会很弱,第一个FID(t1=0)的信号强度为零.但会逐步增强.所以接收机增益的设置不能由前面的FID来确定,而只能由后面的FID来确定,否则会由于接收机增益太大而导致出现许多假峰.但对于TOCSY,NOESY和ROESY实验,由于它们的FID是调制的,因此第一个FID具有最强的信号强度.于是这三个实验的增益可由它们的第一个FID的强度来确定. 同核相关谱实验设置 生物大分子波谱学原理吴季辉 在实验中,NH-?H交叉峰有可能缺失,导致NH-?H交叉峰缺失的原因和相应的解决方法如下: 1. 由于水峰的饱和导致水峰附近的?H共振峰的饱和或部分饱和而引起NH-?H交叉峰缺失.这时可升高或降低温度10?C, 这时水峰移动显著,而?H共振峰基本上不变;

2. 由于NH与H2O存在交换,当水峰饱和时,导致NH共振峰部分饱和因而其强度下降.这可通过改变压水峰方法 (如改用或等),降低温度和pH使交换变慢而避免;

3. 由于小的NH-?H耦合常数或大的线宽导致的反相信号的对消而导致的交叉峰缺失.这可通过降低样品的粘度 (如降低样品浓度或升高温度) 而减小线宽. 同核三维谱 生物大分子波谱学原理吴季辉 从二维谱到三维谱的扩展是很自然的,因其有助于拥挤谱峰的解析.最初进行的三维谱为同核三维谱.同核三维谱相对于异核三维谱有很多不利之处:因为氢谱谱峰数目多,加上重迭严重,要求的采样点数多,这样的三维谱数据量大,采样时间长;

氢核间的J偶合常数不大,相干传递所需时间长,可能由于弛豫衰减而无法实现;

同核三维谱的谱峰数目较二维谱明显增多,谱峰解析困难;

由于没有用到异核的信息,往往不足以解决谱峰重迭的问题,在谱峰归属及序列证认方法上也不如异核三维谱.一般将NOESY同TOCSY串接起来. ........