PDF《中国科学院》

五、感染途径 暴露的皮肤(如眼部黏膜,鼻腔及口腔黏膜) 、注射、直接接触皮肤、气溶 胶都是腺相关病毒可能侵入的途径.

六、微生物在环境中的稳定性 腺相关病毒对化学品十分敏感,常用的消毒剂如1%的次氯酸钠、2%戊二 醛、0.25%十二烷基硫酸钠等均能灭活病毒.

七、实验操作活动 进行腺相关病毒操作的人员,需注意自身防护.穿着实验服或隔离服,戴上 手套、口罩、鞋套等.暴露的皮肤(如眼部黏膜,鼻腔及口腔黏膜) 、注射、直 接接触皮肤、 气溶胶都是腺相关病毒可能侵入的途径.如果工作服污染了腺相关 病毒应在送洗丢弃前消毒, 工作人员不能穿着工作服去实验室以外的地方.操作 病毒时使用生物安全柜, 小心不要产生气雾或液体飞溅,如果操作时台面有病毒 污染,请立即用15%的84溶液擦拭.接触过病毒的枪头、离心管、培养板、培养 液请用84 消毒液浸泡过夜后弃去.如需离心,应使用密封的离心管.注射腺相 关病毒时,使用合格的注射器,操作过程中不要把针头拔离注射器,以免划伤. 实验结束,脱掉手套前先消毒再摘除手套,随后用肥皂和水清洗双手.

八、预防和治疗 建议采取BSL-2级标准及特殊操作规程、防扩散设备和设施.一旦发生意外, BSL-2 实验室危害评估报告

3 按照本实验室《应急预案》进行处理.

九、工作人员素质 工作人员及进入BSL-2实验室的人员,须经过生物安全培训并熟知相关注意 事项.

十、评估结论 在多数情况下,AAV在培养的正常细胞中不发生产毒性感染,只有在辅助病 毒共同感染时, 才发生产毒性感染. 所以我们常用的腺相关病毒具有生物学的安 全性, 但是并不排除有感染的可能,所以在实验操作中工作人员和实验人员应注 意防护,穿戴必要的防护设备,当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应 戴手套.如可能发生感染性材料的溢出或溅出,宜戴两副手套.不得戴着手套离 开实验室. 接触感染性材料的物品需经严格消毒后再丢弃.腺相关病毒的操作实 验建议采取BSL-2级标准及特殊操作规程、防扩散设备和设施. BSL-2 实验室危害评估报告

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第二章 慢病毒危害程度评估报告

一、生物学特性 慢病毒(lentivirus)在分类上属于逆转录病毒科,为二倍体RNA病毒.原 发感染的细胞以淋巴和巨噬细胞为主,导致感染个体发病.慢病毒感染的主要临 床特点是在出现典型的临床症状以前,经历较长的潜伏期,之后缓慢发病,因此 被称为慢病毒. 由于慢病毒载体主要来源为HIV病毒,特别是HIV-1应用的较为广 泛和深入, 因此慢病毒的生物安全性成为使用者担心的主要问题之一.慢病毒的 分子结构被不断改进,主要致力于如何阻止形成有复制能力的HIV病毒,现在应 用比较广泛的是三质粒、四质粒表达系统,该系统中的包装信号被删除,包装序 列不能整合至病毒基因组中, 因此病毒感染宿主细胞后不能复制,也不会利用宿 主细胞产生新的病毒颗粒. 所以我们常用的慢病毒载体中的毒性基因已经被剔除 并被外源性目的基因所取代,属于假型病毒,具有生物学的安全性.由慢病毒制 备而成的载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表 达.在感染能力方面可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、 内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,从而达到良好的的基因治疗效果.