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第三章 重组缺失型狂犬病毒危害程度评估报告

一、生物学特性 野生型Rabies 病毒属于弹状病毒科(Rhabdoviridae) 狂犬病毒属(Lyssavirus).外形呈弹状,核衣壳呈螺旋对称,表面具有包膜,内含有单链负 链RNA. 病毒粒子长约250nm, 直径约为70nm. 病毒基因组长约12kb, 由3′端至5′ 端依次排列着N、P、M、G和L5个基因,其分别编码核蛋白、磷蛋白、基质蛋白、 糖蛋白和转录酶大蛋白. 感染野生型Rabies病毒后,会引起人畜共患的病毒性致 死性中枢神经系统感染疾病, 以恐水、 畏光、 吞咽困难和狂躁等临床表现为特征. 目前神经学研究主要使用的重组缺陷型狂犬病毒为糖蛋白缺失型狂犬病毒 载体,常用的是载体是基于狂犬病毒疫苗株SAD B-19,通过反向遗传学手段,构 建出糖蛋白缺失型的ΔG 狂犬病毒载体, 其目的是更安全有效地用于神经环路的 科学研究. 由于糖蛋白是狂犬病毒感染神经末梢和细胞的必需蛋白,因此这种载 体具有更低的毒性和很高的生物安全性. 除了可以通过感染ΔG 狂犬病毒观察神 经细胞的精细形态, 也可以通过外源性表达糖蛋白的方法实现对所标记神经元的 环路联接进行逆向跨单级突触追踪,所以 被广泛应用于神经环路相关的研究,成 为解析神经环路结构和功能的重要工具之一.此外,在该缺陷型病毒基础上,使 用禽类的反转录病毒糖蛋白(EnvA)进行包裹.由于哺乳动物细胞没有EnvA的受 体, 所以EnvA包裹的重组缺失型狂犬病毒不能感染哺乳动物的细胞.只有当外源 性的禽类受体(TVA)表达在特定神经细胞上的时候,EnVA包裹的Rabies载体就可 以特异的识别出这些神经细胞,在且仅在这些细胞当中表达,也更具有安全性. 并且通过外源性表达的糖蛋白, 这种重组缺失型狂犬病毒可以进一步对这些神经 细胞进行选择性的环路追踪

二、生物安全程度分类 根据中华人民共和国卫生部制定的《人间传染的病原微生物名录》 , SAD B-19 为狂犬病毒(固定毒) ,故而属于第三类病毒.基于该疫苗株发展出来的糖蛋白 缺失的重组狂犬病毒,其致病性则大大降低.

三、致病性 人被野生型狂犬病毒感染后,经过一定潜伏期(通常 1-3 个月),会表现出病 BSL-2 实验室危害评估报告

8 理症状.最初是发热,伤口部位常有疼痛.随着病毒在中枢神经系统的扩散,可 能会有狂躁性或者早瘫性........