PDF《中华人民共和国国家标准》

4 A.4.3.1.3 紫外光检测器:可变波长. A.4.3.1.4 数据处理系统:色谱工作站或数据处理机. A.4.3.2 抽滤系统 抽滤系统使用孔径为 0.45μm 的纤维素酯膜滤纸(用于流动相的预处理) . A.4.3.3 过滤系统 过滤系统使用孔径为 0.45μm 的纤维素酯膜滤纸(用于样品的预处理) . A.4.3.4 微量进样针 HPLC 专用,50μL、100μL(或自动进样器) . A.4.4 色谱分析条件 推荐的色谱柱及典型操作条件见表 A.1,立体化学纯度(L 体)的测定典型高效液相色谱图见 图A.1.保留时间:L 体乳酸钙约 18.5min,D 体乳酸钙约 23.5min(保留时间会有变动,以标准样 品出峰时间为准) .其他能达到同等分离程度的色谱柱和色谱操作条件均可使用. 表A.1 色谱柱和典型色谱操作条件 色谱柱 柱长 150mm,柱内径 4.6mm ,以配位交换型光学活性固定相涂敷于 ODS 二氧化硅的填 料手性色谱柱 柱温 (20~40)℃,控制精度±1℃ 流动相 硫酸铜溶液 流动速度/( mL /min) 1.0 检测器检测波长/nm

254 进样量/μL 5(注入乳酸浓度约为 0.1%) ,D 体与 L 体分离度在 1.0 以上

1 ――L体乳酸钙;

2 ――D体乳酸钙. 图A.1 立体化学纯度(L体)测定典型高效液相色谱图 A.4.5 分析步骤 A.4.5.1 样品制备 称取实验室样品约0.15 g,精确至 0.001g,加热水溶解后,转移至100mL 容量瓶中,稀释至刻 度,摇匀备用. A.4.5.2 测定 t/min GB 25555-2010

5 根据仪器说明书,调节仪器至表 A.1 所示的操作条件,待仪器稳定后即可开始测定.用微量注 射器或用自动进样器进样,用色谱数据处理机或工作站处理计算结果,以面积归一化法定量. A.4.6 结果计算 立体化学纯度(L体)即总乳酸钙中L体乳酸钙的含量X1,数值以 % 表示,按式(A.1)计算:

1 1

1 100 d A X A A = * + A.1) 式中: Al――L 体乳酸钙组分的峰面积;

Ad――D 体乳酸钙组分的峰面积. 取两次平行测定结果的算术平均值为报告结果.两次平行测定结果的绝对差值不大于 0.2%. A.5 总乳酸钙(以干基计)的测定 A.5.1 方法提要 在碱性条件下,以干燥减量后的试样消耗络合剂乙二胺四乙酸二钠标准滴定液的体积计算其总 乳酸钙的含量,用钙试剂羧酸钠指示剂的颜色变化判断滴定的终点. A.5.2 试剂和材料 A.5.2.1 氢氧化钠溶液:100g/L. A.5.2.2 盐酸溶液:1+4. A.5.2.3 乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液:c(EDTA)=0.05 mol/L. A.5.2.4 钙试剂羧酸钠指示剂:称取 0.1g钙试剂羧酸钠盐,加10g在约110℃干燥过的氯化钠研磨, 混匀. A.5.3 分析步骤 称取约0.3gA.6.1中干燥物A,精确至0.000 2g,溶于已加有2mL盐酸溶液的50mL水中,边搅拌边 滴加15mL乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液,再加5mL氢氧化钠溶液和0.1g钙试剂羧酸钠指示剂,用 乙二胺四乙酸二钠标准滴定液滴定至溶液呈现蓝色为终点. A.5.4 结果计算 总乳酸钙含量的质量分数 w2, 数值以%表示,按式(A.2)计算: (V /1000) cM w2 = *100 A.2) m 式中: V ――试料消耗乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液体积的数值,单位为毫升(mL);

c ――乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液浓度的准确数值,单位为摩尔每升(mol/L);

m ――试料质量的数值,单位为克(g);

M ――乳酸钙(C6H10 CaO6)的摩尔质量的数值,单位为克每摩尔(g/mol)(M=218.2) 取两次平行测定结果的算术平均值为测定结果,两次平行测定结果的绝对差值不大于0.2%. GB 25555-2010

6 A.6 干燥减量的测定 A.6.1 分析步骤 称取约1.5g实验室样品,精确至0.000 2g,置于预先在(120±2)℃干燥至质量恒定的扁形称量瓶中,铺成3mm以下的层.在(120±2)℃的恒温干燥箱中干燥4h,置于干燥器中冷却30min称量.保留部分干 燥物(此为干燥物A)用于总乳酸钙含量的测定. A.6.2 结果计算 干燥减量的质量分数w3,数值以%表示,按式(A.3)计算: m-m1 w3= *100%A.3) m 式中: m――干燥前试料质量的数值,单位为克(g);