PDF《黑果枸杞花青素的制备与纯化研究》

3733 selective adsorption. KEY WORDS: Lycium ruthenicum Murr;

anthocyanin;

extraction;

purification

1 引言黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr)为茄科(solanaceae) 枸杞属(Lycium L.)植物, 主要分布于我国西北地区, 其可 食用部位为干燥的果实, 果实中含有大量花青素[1] .花青 素(anthocyanidin)又称花色素, 是自然界一类广泛存在于 植物体内的水溶性天然色素, 属多酚类黄酮化合物.花青 素的基本结构单元是 2-苯基苯并毗喃型阳离子, 即花色基 元. 现在己知的花青素有

20 多种, 自然条件下游离状态的 花青素极少见, 其主要以糖苷形式存在[2-4] . 当前国内外对于花青素的制备主要以溶剂提取、 微波 辅助提取、 超声波辅助提取及超临界流体提取等技术为主. 其中溶剂提取是最常规的方法, 国外曾经在避光条件下采 用低温或高温的方式, 利用盐酸-甲醇溶液浸提 16~20 h 提 取花青素.但由于甲醇具有一定毒性, 不适宜在食品中使 用, 现在多采用盐酸-乙醇溶液进行提取.国内则采用热溶 剂提取 1~2 h 的方式对花青素进行提取, 例如, 孙阳昭等[5] 利用溶剂提取法对红莓果花青素进行了提取;

罗宝生等[6] 也利用此方法对不同种物质的花青素进行提取.另外, 微 波辅助提取是国外学者 Ganzleret 等在

1986 年报道的可以 提取各种化合物中花青素的新方法[7] .2007 年, Sun 等[8] 采用该方法对红树莓花青素进行了提取, 并得到了最佳工 艺条件, 提取出 363.9 μg/g 的花青素.同年, Chen 等[9] 利用 超声波辅助提取法对树莓花青素进行了提取. 花青素的纯化主要采用大孔树脂法、柱层析、高效液 相色谱和膜分离等方法.大孔树脂法因其成本低且吸附效 果好得到广泛应用.杨迎花[10] 对7种树脂的吸附性进行筛 选, 最终得出 AB-8树脂对花青素的吸附效果最好;

周玮婧 等[11] 利用 AB-8 树脂对荔枝皮原花青素进行纯化, 最终得 到纯度为 87.45%的原花青素. Byamukama[12] 用高效液相色 谱法从两种水果中分离出两种相同的花青素. 目前, 黑果枸杞的产量较低, 对其研究也较少, 关于 其中花青素提取纯化的研究并不多见.为了使黑果枸杞花 青素得到充分利用, 对其制备及纯化方法的研究十分必 要.本研究通过乙醇浸提法对黑果枸杞花青素进行提取, 利用大孔树脂对其进行纯化, 确定黑果枸杞花青素制备及 纯化的工艺参数, 为黑果枸杞花青素的开发利用提供理论 和技术支撑.

2 材料与方法 2.1 材料与试剂 黑果枸杞: 采自青海海西州格尔木地区. 石油醚(AR) 、 无水乙醇(AR) 、 盐酸(浓度为36.0%~38.0%)和冰醋酸(AR, 天津市富宇精细化工有限公 司);

醋酸钠(AR, 烟台市双双化工有限公司);

柠檬酸(AR, 天津市河东区红岩试剂厂);

磷酸氢二钠(AR, 天津天力化 学试剂有限公司);

氢氧化钠(AR, 天津恒兴化学试剂制造 有限公司);

AB-8 大孔吸附树脂(天津波鸿树脂科技有限公 司);

矢车菊素-3-0-葡萄糖苷标准品(纯度≥98.0% (HPLC), 上海源叶生物科技有限公司). 2.2 仪器与设备 TCL20MW 台式大容量高速冷冻离心机(湖南赫西仪 器装备有限公司);

RE-2000B 旋转蒸发器(上海亚荣生化仪 器厂);

恒温水浴锅(上海伊朗仪器有限公司);

冷冻干燥机 (上海伊朗仪器有限公司);

DHG 9070A 电热鼓风干燥箱(上 海一恒科学仪器有限公司);