PDF《黑果枸杞花青素的制备与纯化研究》

3 次. 2.3.4 花青素提取工艺优化实验 在单因素实验的基础上, 采用正交法设计实验组合, 对多因素对提取效果的影响进行研究.按正交表 L16(45 )对 提取温度、提取时间、料液比和乙醇浓度

4 个因素进行优 化[15] .因素水平见表 1, 实验重复

3 次. 表1L16(45 )正交实验因素水平表 Table

1 Design of orthogonal of L16(45 ) 水平 因素 A: 提取 温度/℃ B: 提取 时间/h C: 料液比 /(g/mL) D: 乙醇浓度 (%)

1 30

1 1:10

65 2

40 2 1:20

75 3

50 3 1:30

85 4

60 4 1:40

95 2.3.5 黑果枸杞花青素的纯化 (1)大孔树脂的预处理 将AB-8 大孔树脂用无水乙醇充分浸泡后, 用水冲洗 取代乙醇, 再分别用 5%的HCl 溶液和 2%的NaOH 溶液冲 洗, 最后用蒸馏水冲洗至中性, 滤去水分备用[16,17] . (2)pH 对吸附的影响 将用柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲溶液配制成的不同 pH 的黑果枸杞花青素溶液

50 mL 加入到 0.5 g 经预处理的 AB-8 树脂中, 在振荡器上振荡

1 h 后, 静置

20 min, 测定 花青素溶液在最大吸收波长处的吸光度, 计算吸附率, 试 验结果以

3 次重复测定的平均值表示. 吸附率: 若花青素溶液在吸附前的最大吸收峰处吸 光度为 A0, 吸附后花青素溶液的最大吸收峰处吸光度为 A′, 则吸附率=(A0-A′)/A0. (3)温度对吸附的影响 将50 mL pH3.0 的花青素溶液加入到 0.5 g AB-8 树脂 中, 在不同温度下恒温振荡吸附, 每隔

10 min 测定花青素 溶液在最大吸收波长处的吸光度, 以3次实验结果的平均 第9期杭园园, 等: 黑果枸杞花青素的制备与纯化研究

3735 值作吸附率随时间的变化曲线. (4)流速对吸附的影响 将用 pH3.0 的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液配置的 0.5 g/L 花青素溶液

200 mL 自上而下通过 AB-8 树脂柱(直径

1 cm, 树脂高度

15 cm), 控制流速, 分段收集流出液, 于最 大吸收波长处测定其吸光度, 实验重复

3 次. (5)流速对解吸的影响 使pH3.0 的黑果枸杞花青素溶液流经 AB-8 树脂柱(直径1cm, 树脂高度

15 cm), 使流出液的吸光度值与上样液 的吸光度值基本接近, 使树脂对花青素的吸附达到饱和, 然后用 95%乙醇洗脱, 测定在不同洗脱流速下分段收集到 的流出液的吸光度值, 实验重复

3 次. (6)树脂的饱和吸附量测定 将pH3.0 的黑果枸杞花青素溶液以

1 mL/min 的流速 通过直径

1 cm, 树脂高度

15 cm 的AB-8 树脂, 检测流出液 的吸光值.当流出液的吸光值与上样液的吸光值基本接近 时, 用蒸馏水冲洗树脂柱, 再用 95%乙醇洗脱, 收集洗脱 液至无色, 将洗脱液冷冻浓缩干燥, 得紫黑色粉末状固体, 以3次实验结果的平均值计算饱和吸附率. 饱和吸附率=花青素重量(g)/湿树脂体积(mL). (7)树脂的吸附率和花青素回收率 将200 mL pH3.0 的0.5 g/L 黑果枸杞花青素溶液以

1 mL/min 的流速通过 AB-8 树脂柱, 吸附结束后, 测定最大 吸收波长处的吸光值, 计算吸附率.用酸性水溶液冲洗树 脂柱, 再用 95%乙醇溶液以

1 mL/min 的流速洗脱, 分管收 集洗脱液, 测定最大吸收波长处的吸光........