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(b) 应特别小心,以便保护样本、采样设备和采样容器不受外部污染;

第4页共9页CODEX STAN 294R-2009 (c) 样本应保存在加盖的清洁及干燥的容器中,尤其应带有关于取样日期、卖方姓名以及货物销 售其他特点等详细采样说明. 9.2 分析方法 9.2.1 辣椒素的测定 按照 AOAC 995.03 或附件描述的方法进行. 9.2.2 粗蛋白的测定 按照 AOAC 984.13 规定进行(氮转换系数为 6.25). 9.2.3 水分的测定 按照 AOAC 934.01 规定进行. CODEX STAN 294R-2009 第5页共9页附件 用气相色谱法测定 Gochujang 中的辣椒素 1. 范围 本方法适用于利用色谱法确定 Gochujang 的辣椒素.本方法使用鲨烯作为一种内部标准液.辣椒素 的浓度以百万分率(ppm)表示. 2. 原则 为提取辣椒素,将混合物搅拌均匀.Gochujang 中辣椒素的提取使用 100%的甲醇,然后通过甲醇 C 己烷分馏,使用分液漏斗去除亲水和疏水干扰物质.甲醇层中的辣椒素使用二氯甲(DCM)和饱和 NaCl 提取,使用旋转脱水器浓缩.然后取一份浓缩样本提取物,与二氯甲完全溶解,作为气相色谱 检测法分析用的一种内部标准液. 3. 试剂和材料 在分析中,除非另有说明,使用的试剂须达到分析等级,水至少达到 ISO3696 规定的

3 级. 3.1 试剂 3.1.1 辣椒素(99 + %, C18H27NO3, Fw 305.42, CAS 404-86-4) 3.1.2 鲨烯(CAS 111-02-4) 3.1.3 己烷 3.1.4 甲醇 3.1.5 甲醇 + 水(80 + 20) 3.1.6 二氯甲 3.1.7 氯化钠 3.1.8 硫酸钠 3.2 标准溶液的配制 3.2.1 辣椒素储备溶液(A) 称取约 100mg 辣椒素放入量瓶,使用 DCM 稀释到 100ml,制成大约

1 000μg/ml 的溶液(A). 3.2.2 辣椒素工作溶液(B) 使用 100ml 的DCM 稀释 10ml 的溶液 A(3.2.1),获得恰好 100μg/ml 的DCM,配制 100ml 的中间 溶液 B. 3.2.3 鲨烯内标工作液(C) 称取大约 100mg 的鲨烯放入量杯,使用 DCM 稀释到 250ml,制备约 400μg/ml 的DCM 溶液(C). 3.3 辣椒素校正溶液 将100μg/ml 溶液(B, 3.2.2)放入干燥的 50ml 圆量瓶,再加 2ml 内标工作液(C, 3.2.3),配成 10.

0、50.

0、100.

0、300.

0、500.0μg/ml 的辣椒素. 4. 仪器 4.1 带火焰离子化检测器(FID)的气相色谱仪 以下为适宜条件: 4.1.1 注射器/检测器温度:320℃ / 350℃ 第6页共9页CODEX STAN 294R-2009 4.1.2 烘箱温度程序:220℃ /min,按5℃ /min 提高到 250℃,保持

13 min,再按 20℃ /min 提高到 280℃,保持

5 min.氦运载气体为 1.5ml/min. 4.1.3 按1:5 的分流率分流注入 1.0ul. 4.2 GC 柱,30 m x 0.32 μm,0.25 μm 膜厚,HP-1 或等同物 4.3 分析天平,精确到小数点后第四位 4.4 摇荡器,可达 2,000 rpm 4.5 离心机,可达到 3,500 rpm 4.6 滤纸(Waterman

2 号或等同物) 5. 实验室样本 样本收到时应标有单独的样本号.Gochujang 样本应在 4℃以下保存.所有其他样本在分析前放入密 封容器内室温保存. 6. 程序 6.1 实验室样本 样本应切碎或粉碎成均匀混合物.所有样本在分析前应放入密封容器内室温保存.所有样本在分析 前应彻底混合成均匀混合物. 6.2 检测样本 6.2.1 彻底混合样本.称取 10g Gochujang,精确至 0.01 g,放入离心瓶(250ml, Nalgene). 6.2.2 加入 50ml 甲醇,摇晃 2hr,提取辣椒素. 6.2.3 用Watman

2 号滤纸滤出提取物,放入 250ml 的量瓶(提取物CA). 6.2.4 向剩余物再添加 30ml 的甲醇,摇动 1hr,提取辣椒素(提取物CB). 6.2.5 重复步骤 6.2.3 至6.2.4(提取物CC). 6.2.6 将提取物CA、提取物C B 和提取物CC 并入 250ml 的圆底量瓶,浓缩至约 5ml. 6.2.7 使用 20ml80%的甲醇和 20ml 己烷溶解浓缩物. 6.2.8 将溶液转入一个 250ml 的分液漏斗. 6.2.9 摇动并分离成两层,即甲醇层(M1 层,上层)和己烷层(H1 层,下层). 6.2.10 将Hl 层存入 100ml 的量瓶中,将M1 层(6.2.9)倒入一个分液漏斗,再加 20ml 的己烷. 6.2.11 重复步骤 6.2.9 至6.2.10(M2 层和 H2 层). 6.2.12 重复步骤 6.2.9 至6.2.10(M3 层和 H3 层). 6.2.13 将H1 层、H2 层和 H3 层(HC 层)并入 250ml 的分液漏斗,添加 20ml 80%的甲醇,摇动并 分离成两层,即甲醇层(M'