PDF《禽网状 内皮组织增殖病病毒LTR序列的启动子功能》

第19卷 3期2004年 6月中国病毒学VI R oL OGl CA S l NI CA

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5 5 ―

2 58 J u n e

2 0

0 4 禽网状 内皮组织增殖病病毒L T R序列的启动子功能 赵文明 ,丁家波

2 , 姜世金

2 , 崔治中

2 (

1 .

扬州大学畜牧兽医学院, 江苏扬州

2 2

5 0

0 9 ;

2 .山东农业大学动物科技学院,山东泰安

2 7

1 0

1 8 ) The Pr o m o t ing Func t io n o f Lo ng Te r mi na l Re p e a t f r o m Re t i c u e n do t h e l i o s i s Vi r u s Z HAO W e n ― mi n g , DI NG J i a ― b o. , J I A NG S h i - j i n . , C U I Z h i ― Z h o n g . f J . C o l l e g e o f A n i m a l Hu s b a n d y a n d V e t e r i n a r y Me d i c i n e , Y a n g z h o u U n i v e r s i t y , Y a n g z h o u

2 2

5 0

0 , C h i n a;

2 . C o l l e g e o f A n i m a l S c i e n c e a n d T e c h n o l o g y , S h a n d o n g A g r i c u l t u r a l U n i v e r s i t y , T a i a n

2 7

1 0

1 8 , C h i n a J Abs t r a c t :

1 1

1 e l o n g t e r mi n a l r e p e a t( L TR)o f R e t i c u e n d o t h e l i o s i s v i r u s( RE V)wa s a mp l i f ie d b y P CR t e c h n i q u e a n d c l o n e d i n t o p UC

1 8 v e c t o r a t t h e s i t e s o f Ec o a n d S a c I . a n d t he BGH p o l y a d e n y l a t i o n s i g n a l s e q u e n c e wa s c l o n e d a t t he s i t e s o f S p h I a nd Hi n d I I I a s a t e r mi n o r .

1 ] h e p o s i t i v e c l o n e wa s n a m e d p UC― L TR. wh i c h wa s u s e d a s a b a s i c e x p r e s s i n g v e c t o r t o v a l i d a t e t he a c t i v i t y o f LT R. Gr e e n f l u o r e s c e n t p r o t e i n ( GF P )a nd RE V e n v e l o p e g l y c o p r o t e i n

9 0 ( g p

9 0 )g e n e wa s c l o n e d a t t he d o wn s t r e a m o f L TR i n t he p UC― LT R v e c t o r r e s p e c t i v e l y a s a r e p o r t e r .T h e s e t wo r e c o mb i n a n t s p UC― I r R― GF P a nd p UC― L TR― g p

9 0 we r e t he n t r a ns f e c t e d i n t o Ch ic k e n E mb r y o F i b r o b l a s t ( CE F ) c e l l s .

48 h a f t e r t h e t ra n s f e c t i o n. we c o u l d d e t e c t t he e x p r e s s i o n o f GFP a n d g p

9 0. Th j s s t u d y s h ows t he LTR s e q u e n c e c o u l d b e u s e d a s a p r o mo t e r t o c o n s t r u c t e x p r e s s i n g v e c t o r s . Ke y Wo r d s : R e t i c u e n d o t h e l i o s i s v i r u s( REV) ;

L o n g t e r mi n a l r e p e a t s( L T R) ;

P r o mo t e r :E x p r e s s i n g vec t or 摘要:通过P C R 方法 ,将禽网状 内皮组织增殖病病毒 ( R E V)的长末端重复序列 ( L T R )扩增并克隆进p U C 一18质粒多克隆位点 ( MC S )的E c o R I ~I S a c I 之间,并以B GH 基 因的多聚腺苷酸序列作 为终止子克隆到S p h I ~Hi n d H I 之间,构建成重组质粒p U C ― L T R.将G F P 基 因和R E V 囊膜糖蛋 ~ l g p

9 0 基因分别克隆~ l J p UC ― L T R载体 中,获得质粒 p UC ― L T R ― G F P 和质粒p U C ― L T R ― g p

9 0 .重组质粒经转染4

8 h ,能够检测到外源基 因的表达.本研究提示,R E V L T R 能够作为启动子构建表达质粒. 关键词:禽网状 内皮组织增殖病病毒 ( R E V);

长末端重复序列 ( L T R);

启动子| 表达质粒 中图分类号:$

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2 .

6 5 文献标识码 :A 文章编号

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0 4 禽 网状 内皮组织增殖 病病 毒(Reticuendotheli―osisvirus,REV)是禽 网状 内皮 组织增殖 病 的病 原,属反转录病毒科中C 型致肿瘤病毒类 的一种.该病 毒主要侵害火鸡 ,但也能引起鸡、鸭等禽类以淋巴 一 网状组织增生为特征的肿瘤性的病理综合, 征【