PDF《不同介质标本中人乳头瘤病毒 E6 癌蛋白 检测效果对比研究》

6 的高表达是引起细胞癌变的必要途 径.当HR-HP V D NA 通过非同源重组整合到宿 主细胞基因组后, 高表达的 E

6 癌蛋白与 p

5 3 蛋白 结合, 使肿瘤抑制基因p

5 3失活, 损伤细胞 D NA, 激 活端粒酶, 引起细胞过度增殖, 触发细胞永生化及恶 性转化, 最终导致肿瘤发生[ 6, 7] .基于 E 6蛋白在宫 颈癌发生发展中的重要作用, 目前已研发出一种新 型的 HP V E

6 癌蛋白检测方法(OncoE6TM T e s t , A r b o r V i t a C o r p o r a t i o n ;

AV C;

S u n n y v a l e ,C A) , 可以半定量检测 HP V

1

6、 HP V

1 8和/或HP V

4 5等 型别的 E 6癌蛋白[ 8] .前期大规模人群研究也证实 O n c o E

6 TM 检测法对宫颈上皮内瘤样病变 2级及以 上( C I N 2+ ) 诊断的特异度和阳性预测值高达99.1%和4

6 . 9%, 可有效区分一过性感染和持续感 染, 提供更多病变相关信息, 有望成为 HP V 阳性妇 女有效分流手段[ 9] . 而一种新型技术的成功推广涉及多个环节.其 中取样方式和储存介质是决定检测技术是否适合大 范围推广应用的关键因素之一.本研究中, 我们用 O n c o E

6 TM 检测法对棉签取样标本和 T h i n P r e p宫颈 刷取样并存于 T h i n P r e p细胞保存液中的宫颈脱落 细胞标本( 简称 T h i n P r e p标本) 进行检测并评估不 DOI:10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003440 同取样介质和储存条件下, O n c o E

6 TM 检测法检测结 果一致性和对宫颈癌及癌前病变的筛查准确性, 从 而为 E 6癌蛋白检测技术的进一步推广应用提供更 多科学证据. 材料与方法

1 研究对象 本研究基于1

9 9 9年在山西襄垣县建立的山西 省宫颈癌筛查方法研究 Ⅰ( S h a n x i P r o v i n c e C e r v i - c a l C a n c e r S c r e e n i n g S t u d yⅠ,S P O C C SⅠ) 队列, 以S P O C C SⅠ 队列中2

0 1 4年第三次随访时被检出 HP V 阳性的妇女为研究对象.S P O C C SⅠ 队列在

1 9

9 9年基线时要求筛查对象在

3 5~4

5 岁, 有性生 活史, 有完整子宫, 无子宫颈癌及癌前病变史, 无盆 腔放射治疗史, 未怀孕及无其他检查禁忌症, 自愿参 加并签署知情同意书.随访时要求筛查对象未怀 孕, 无检查禁忌症, 并再次进行知情同意.基线和随 访研究均获得中国医学科学院肿瘤医院伦理委员会 批准.

2 研究流程

2 0

1 4年接受随访的所有筛查对象( N=1

4 1 6) 均接受了 HR-HP V D NA 检测和液基细胞学( l i q - u i d - b a s e d c y t o l o g y , T h i n P r e p ) 检测, 并用棉签在宫 颈口刷取了宫颈脱落细胞标本.HR-HP V 或细胞 学任一结果阳性者转诊阴道镜, 在阴道镜下发现异 常者进行直接活检或四象限活检;

当阴道镜不满意 时行宫颈管搔刮术;

HR-HP V 和细胞学结果双阴性 者无需接受阴道镜检查.对此次随访中 HR-HP V D NA 检测阳性妇女剩余细胞学标本和棉签标本进 行了 HP V E 6蛋白检测和 HP V 基因分型检测.

3 主要实验室检测方法

3 .

1 H R-H P V D N A 检测和基因分型 采用第二代杂交捕获技术( H y b r i d c a p t u r e 2, HC 2,美国, Q i a g e n公司) 对宫颈脱落细胞学标本 进行 HR-HP V D NA 检测. 该技术是一种HR - HP V D NA 半定量检测技术, 可同时检测13种HR-HP V ( HP V

1

6、HP V

1

8、HP V

3

1、HP V

3

3、 HP V

3

5、 HP V

3

9、 HP V

4

5、 HP V

5

2、 HP V

5

6、 HP V