PDF《维普资讯 http://www.cqvip.com》

3 一姐1993年

1 2月中国病毒学VIROLoG l CA SDⅡCA

6 瀑1Vo

1 .

8 No .

4 De c .

1 9

9 3 孕产妇生殖道单纯疱疹病毒感染垂直污染羊水的研究 唐 家琪 李越希 潘秀珍 李先富 于明明 提要用DNA聚台酶链反应 庸m尺.PR3rl{病毒( 碰Ⅳ) 特异性棱酸 , 调查 l

0 0 名孕 生殖器官受 墙 v感染和羊水受 污染的情况.结果表明 : 受感染的 产妇垃产遭途径 . 污染羊水的机率分别为

1 1 .

1 (

1 /

9 ) 和54.S~(

6 / l

1 ) l 原发性 H S V 、 继发性 H S V垂直 污染羊水机率分别为

6 6 .

7 和29.4l不同妊娠期和生育胎疚对污染率无显著性影响. 关键词璺堑堡塑塞, D N A 聚合酶链反应. 酶联免疫吸附试验. 垂直传播.Zs母体妊娠 期阐的生理变 化,可导致 藏匿于神经节 中、处于潜伏 状态的单纯疱疹病毒 ( H VS ) 活化 . 活化的 H S V沿着神经树突到达感觉 神经末稍支配 区域 , 并在局部复制产生传染性 H S V, 形成症状疱疹或无症状疱疹[ . 发生于母体生殖器 官的疱疹可使胎儿或新生儿受感染 . 少效 受感染者 产生严重病 损.甚至致残或致 死;

多效受感 染者当时虽无症状疱疹的病损 , 却终生携 带HSV或其基因 . 日后 多次发生症状疱疹‰ .本研究对孕产妇 H S V感染后 其子代羊水受 污染情况进行研究 , 旨在阐 明HSV垂 直传播 的影 响因素 , 以便采取有效 、 可行 的预 防措 旖,进一步提高 我国的妇幼保 健和优 生优育水平 . 材料与方法 l 研究对象 由南京市江浦县妇幼保健所 、 江浦县人民医院协助随机选择 , 包括中其妊掘 三弓I产的孕妇

3 8 人,晚期妊娠引产孕妇 l O人, 共计

4 8 人, 均用药物引产 l 正常产道分娩的产妇

5 2 人. 被研究的

1 9

9 名孕产妇中. 头 胎妊娠者

5 9 人.二胎 上妊娠者 d { 人.

2 标本果羹和处理 对弓 l 产的孕妇 , 用无菌椰拭副取宫颈分泌物及欲脱落细胞 . 将其溶于

0 l m o l / L , p H

7 . 的p B S1 .

5 叫中, 作为检测母体的标本 { 在注入弓 l 产药物之前 , 用注射器穿刺抽取羊水

5 m l 于另―试管中 . 作为 检测胎儿羊水的标本. 对产道分娩产妇 , 分娩时用上述方法取宫颈样本作为检测母体的标本 ・ 破水后用试管接 取经产道流出的羊水作为检澜新生儿羊水标本.全部采集的标本均如下处理 ,

2 O O

0 r / m离J

1 5 分钟 { 弃上清 , 用rE溶液

5 呲 溶解沉淀 , 煮沸

1 5 分钟后加砖无水乙醇 I O 呲,置- -7

0 C

2 9 分钟 l

4 V .

1 9

9 9

0 r / m离心

2 0 分钟 , 弃上清 , 将DNA沉淀溶于无菌去离子水

1 O 中, 煮沸变性

1 0 分钟后立即放一2 O ℃保存 , 供PcR检测用.

3 H S V标准毒株 H S V -

1 标准毒株为 s M. 株.由北京生物制品研究所引进 ;

} 珏Iv.2标准毒株为 s a y株,由成 都生物制品研究所引进. 上述两毒椿在 B H K 一21纽胞中传代 . 待出现%病变后一7 O ℃琼存 . 供PCR和 E L I S A试 验用 .

4 P c R引袖的设计与合成 根据引物设计原则和计算机处理结果 , 引物选于 D N A多聚酶编码区[

5 ] . 左侧引物 ・率于1993年2月 2日收到 .

1 9

9 3 年 6月

3 0日惨回 维普资讯 http://www.cqvip.com 第{期唐家琪等 孕究345同源 于}珏Ⅳ.

1 D NA多聚酶 基因 的1944-1960段.为

5 , - 性为15/171右侧 引物 互补 于HSV-1DNA多聚酶 基因的2166-2149段 , 在p-