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牺搠哟第10卷第1期'

中国病毒学vo1.

10N0.11995年 3月ⅥROL OGl CA s 】 【 Nl C A Ma r .

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9 5 鼻咽癌 中Epstein―Barr病毒基因结构特 点姜志龙鳇陈诗书

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7 、口/、//提要 鼻咽瘟中感染的 E B V以潜伏态f f - / E , 只有少数基因得到表进 .我们 从分子生物学术平研究 其潜伏机制. 已知 B Z L F I 基因和 B a m H l E Z片段内部分基因对 E B V的复制激活起荚键作用. 我们用 体外基因扩增( P C R ) 法扩增 l Z Z [ ~l 基因外显子一 I 序列. 并用序刊分析法研究了该基因结构特点 . 此外, 检测了 B a m H l E Z片段内的基因缺失 , 结果发理

2 l 倒鼻咽瘟( N P C ) 组织- l

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I I 倒育 B a m H

1 E Z片段内缺失 , 长述 卫g g 岫. 与潜伏态存在的 R E I Z '

q类隹 l .提示鼻嘲瘟・ 『

1 的EIZV以潜伏态存在 . 与NPC发 病有关 . 关键调 鼻咽瘟( N P C ) . E 吖,多囊爵链反应 , D N A序剃分析 鼻 咽癌( NP c) 是较常见的一种恶性肿瘤 , 它的发生与 E B V感 染密切相关.从病 凡血船组 织 中可检 测到 L MP和EBMA一 1抗 原,而束发 现有复 髑激 活状 态产 生的抗 原【 , 提示NP c中EBV以潜伏状 态存 在. 近来的研究表明 . 潜伏期产生的 L MP蛋 白可抑翩 卜 皮细胞的分化嘲 提示E,以潜伏的形式诱导 鼻咽癌的发生 . 已知 B a mH I z片段 内BZLF基因编码的复制激活蛋 白( Z E I Z R A) 是激 活EBV的关键 因素 , B a ml - [ I E片段 内BERF5编码的蛋 白质 也起重要的激活作 甩 .这些 区域 内的基因 突变或缺失将影响 E B V的激活 , 使之 以潜伏 态存在 .为此 , 我们设计 和台成了 多对 引物 , 甩PCR法对这二段 序列进 行了检测和结构分 析,从而探讨 E B V与NP c发生的机 制.材料和方 法l材料和试 彝I 来潭 鼻嘲瘟活检组织由上海市第

一、 第九人民医院提供 . 经病理诊断l 为低分化型鳞癌.E B V的R 鲫 细胞 D N A 和B95-8细胞 D NA 由本实验室 自备. T D I q A多聚酶 购 自华美生物

1 : 程公 司和 H己 L公司 . d N T P 、 尿素 、 丙烯酰 胺购 自PharmacJa.[a--~ p ] d c I '

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0 0 e i /m l l f f o l / L ) 购自A r n e r s h s m. 其它试剂为国产分折纯.

2 鼻 咽癌 缎织 D NA抽提 纯他 参照卢健 荨方法 [ | 】 . I 引物构选 择与 合成 根据 E B VB

9 ~ - 8株聊DNA顺序[ - 在l~m l '

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1 A D NA台 成仪 台成 的弓 『 物先 经氲氯 化铵处理 , 然后 用20聚丙烯 酰胺凝 腔 电诛 分离 , 切下 相应条 带,用 m/

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2 9 中的引物洗脱下来 . 澳IO.D疽后 , 滔棒沉淀 , 将沉淀熏涫于 f b O , 使榷 度l50ng/,分装后 , 一2

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