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8 5 b p片段,而束见 】
7 1 b p , 提示该 片段 内出现了新的酶位点.NP C 是一例 无BamH I E Z片段缺 失的病 人,酶切结果提 示1个Hi n dI G 酶切位点的丢失.为了进一步研究该基因的结 构特点 , 我们将谈
4 4
5 b p的PcR扩增 产物进行了克隆和序列分析 . 结果与 B
9 5 8E B V的相应序列对照 . 提 示该 基 因第 d 8位和 第73位分别发 生GA C - b G AT、 GC T - - ) T C T的中性和错 义突变 , 后 瞢突变使 一个 Hi n dI G 位点发生丢失 , 其它序列均与 B
9 5 ―
8 E B V序列相 同( 见图 】与罔 d ) . 田2以ASE2/SZ4为内0 『 物.对不同书源鼻咽癌组 织DNA进行 P C R扩增 .
6 辈 烯雕胺凝腔电攮分析图谱 . 璜期 P c R扩增片殷大小为
7 0
0 ~. J { 标准抹 B
9 5 -
8 D N A)
2 ~4 ;
鼻蝈癌组织D N A F
5 : 敏失型 R a 苴D N A F
6 } D N A分子量标 记123却DNAhd d F
2 僚ra1IPcR喇DNA w i l h~ r n c t A SE
2 / S Z
4 、 e x p e c t e d kn h P ( p r o d u c t s Z O O m.L i n e1 .B
9 5 - 8DN A L i n e 2-
3 ・ { NPC DNA- L i ne 5-Ra E BV DNA. I /n o
6 .
1 23 bp E C
4 A L a d d e r . 维普资讯 http://www.cqvip.com 第1期差志龙等 : 鼻咽癌中E p s [ e j n . B B r r 病毒基因结构特点 ― 丁TTCT(0一-1A^C图3以ZlR/Z2为 扪I物.对鼻蝈癌 组织DNA进行 P ( _ R扩增.预期扩 增 片段 大 小为
4 4
5 b p . 经限 制性 I ± l 切 酶爵 解后.电溶舟析可碍 】
8 9 b p .
1 7
1 b p 和85bp大小片段.'
. 讣干量标记 l
2 孙p饼'
At 帕'
2.3:鼻咽癌组织 l ^ ・ P R 产物经 H i n d 靠辟I
4 ~6 : 鼻咽癌组织 D N A . 图4EBVB丑J P l 墓四外 于_ l 区域核酸序列舟析电泳图谱 与标准株 B
9 ~ -
8 核酸序列意较 . 发现
1 倒标车中百二处 点蹇变.F3AmN~e df r ~ e u t sf r o m N P fD NA 血p r , m~ZI R/ z
2 , c x p e c l e dkn 啦ofPcRpr0duc倍i s
4 4
5 b p . 眦prodL瞻rcc~tedwi t h Hi n d ( ~- e c t t y.L e 】 .
1 2 p D A hd d un e 2. 3. NPC .DN^. P(
1 R 删 s坩 e d e d wi t h Hj n d .t h e r e s u hi n
8 n 曲re】
89 .1
71 却.85 bm U 4. 5.6 r i PE A. F .
4 I ~ L F1 g 胂ee姗一1scqu e n ~ g 惭.NPC 40,1 w0 mu d
0 噼we r e f o u n d.o o m p 丑r酣to~a n d a r d R9 5-
8 E DN A . 讨论EBV可引起 NP C、 B u r Mt t , S 淋 巴癌等 多种疾病 .在发病前
1 ―2年或 发病早 期.均能捡j 煲i到EBV的早 期抗 原.但发 病后 , 仅 能检 测到 L MP 、 L P和 6种 E B NA ~等几种潜伏 期蛋 白[
1 一,提示 E B V 由复制激活状态转入潜伏状态过 程可能与 N P C的发生有关.目前的研究结果表明 , L MP、 E B N/ ~ 2影响到宿 主细胞的生长调节 , 抑制宿 主细 胞的束期分化[ 日1.可见潜伏 态存在的 E B V与致癌直接相关 . Ga n f ~ n o等研究了 B u r k l t t S 淋巴瘤 E B V, 结果提示 E B V与 宿主细胞 X 譬染 包体 发生整合而存 在[ , 很可能在整 合过程中发生了与病 毒激 活有关的基因的丢失.使EBV转入 潜伏态.H a t f u
1 等的早期 研究结果提示 , 在RajiEBV中 , 出现 B a mH I E Z片段 内的
2 .
9 9 k b缺失和EcoRIDh e ! 区域 内的 太范罔的缺失 , 分别导致 了BERF
5、BZLF2和BALF1 、 B A
1 . F ~ 、 B A RF ~ 基 因阅读 框架的去除或损坏 , 而 这些基因的功能与 E B V的复制激活态关 系密 切 .虽然 B a mHI T ^ c c ^ G 维普资讯 http://www.cqvip.com 中国病毒学第1O卷 E z片段的缺失未影响到 B Z L F 基因的阅读框 架,但缺失已深 入到 B Z L F 基 因的