PDF《薄层色谱讲座》

3 微量点样器( Mi c r o - A p p l i c a t o r ) , 用于需要调节体积及没有毛细作用的键合相薄层的 点样. 毛细管式的微量 点样器装在手动的 Na n o m a t Ⅱ 型点样装置的磁性 点样头上,点样头装 在簧上.按下此点样头,毛细管借恒定的压力接 触 薄层表 面.点间距离由带准确的5 mm间隔的V字形缺刻装 置控制;

注射器式的毫微点样器及微量点样器由测 微尺控制,也可与Na n o m a t 型点样装置配合,以 使点样位置精确. 电动的Na u o m a t 型点样装置完全适用于上述 各种点样器的配套使用,并且还可以自动控制点样 次数, 点样器 在薄层上的停留 时间,以及点样器接 触薄层的速 度,此外,还可以用于圆 芯展开及反圆 芯展开时薄层的点样. (

2 ) 喷雾带状点样 当样品溶液体 积 较大 (

1 9

9 ) 而要进行定量点样时,可以 杂用Li n o m a t 型点样设备进行样品的带状点样.样品溶液吸在 微量注射器中,点样器不接触薄层,而是用氮气将 注射器针尖的溶液吹落在薄层上,薄层板在针头下 定速移动点成0 -1

9 9 mm的窄 带状点样展开后 的斑点的分辨率高于点状点样. (

3 ) 自动点样 A u t o ma t i c T LC S a m p l e r 型设备是全自动的点样装置,吸样、 点样、 清洗、 样品及标准品位置的安排以及点样速度等全部由程 序控制, 点样量为1

0 0 n l -2

0 .这种点样器是注射 器式的,但不用喷雾技术,而是靠调节点样速度控 制原点大小的一致.这种点样器的特点是节省时间 及提高点样的精度,但是价格较贵. 被分离的样品为液体或固体混合物时 需要用中等极性的溶剂稀释或溶解 成一定浓度的溶液点 样.对生物样品 ( 动植物组织、体液… … 等)中某 些成份的分离定量时,首先要将样品中的被测成份 定量地提取出来,视含量高低稀释或浓缩成一定浓 度的样品溶液,因为薄层吸附剂不必反复使用,且 层析过程同时也有净化的作用,所以多数情况样品 溶液可以直接点样,不必预处理.如果样品中欲测 成份量太低、杂质量太多或供试液中的杂质使展开 后的色谱背景太深或影响分离时,对样品溶液用萃 取、吸附或点样前衍生化等 方法进行预处理是必要 的.

1 - 3展开(1展开方法 点样后的薄层置密闭的玻璃 层析槽中用合适的展开剂展开.展开剂浸入薄层下 端高度不应超过

0 .

5 c m, 点样处不能接触展开剂, 展 距一般为

1 0 -1

5 c m 软板只能进行近水平展开, 薄 板与水平成

1 5 -2

0 角;

硬板可以进行近水平、 上行、下行、双向、多次展开等.展开槽有直立式、 平卧式、双槽式、夹心式或水平 式(CAMA G T V A R1

0 - KS C h a m b e r. V A R1

0 -KS C h a mb e r 是为2

0 2

0 c m薄层板 设计的水平展开槽, 其优点是展开剂用量少, 对同一 块薄层上的几条被隔开的样品带可以用不同展开剂 同时展开,便于选择展开剂,也可在展开时用适当 水蒸气或不同的溶剂蒸气对薄层板进行饱和. 为了使展开槽内能被展开剂蒸气饱和,使展开 剂组成不变, 得到理想的分离及重现的结果, 展开槽 必须密闭. 除用夹心槽外, 当使用极性相差较大的多 组分展开剂时,必须将点样后的薄层板置展开槽内 预饱和以克服边缘效 应.常规薄 层一般展距最多为

2 0 c m ,对难分离的物质不能靠增加展距来提高分离 度. 展距过长不仅延长展开时间, 更严重的是会引起 斑点扩散, 因此,在一般展距内分离不够满意时, 可 以调整展开剂组成或改变展开方式,如多次展开就 是不增加板长而改进分离的一种简单易行的方法.