PDF《DNA 合成原理概述》

5 10 个碱基的寡核苷酸合成完成后,粗反应混合物约含有 91%的完整片段(精确计算应 为0.999=91.35%) 和约9% (精确计算应为1-0.999=8.65%) 的短片段即truncated sequence 或称失败序列(failure sequence) ,因为在自动合成过程中,进一步的偶联反应已被加帽步 骤阻止而不能进行了.尽管所有短片段约占粗反应产物组成的 9%,但其中任何一种都以很 低的浓度存在. 一般 PCR 反应对少量杂质不敏感,因此一些研究者认为没有必要纯化去除短片段.以 上讨论可以看出,50 个碱基的寡核苷酸粗制品中,其短片段累计约 50%(精确计算应为 1-0.9949=38.89%) ,因此较长的寡核苷酸片段常常需要纯化. DNA 寡核苷酸片段的纯化策略 有几种技术可用于纯化 DNA 寡核苷酸片段.选择正........