PDF《薛艳华灵芝孢子几种破壁方法比较分析_薛艳华》

2 实验方法

2 .

1 CO2 超临界破壁处理法 取100 g灵芝孢子粉于

1 L超临界萃取釜中 ,萃 取釜和分离釜的温度和压力分别设置为

35 M Pa、 40℃ 和6M Pa、50℃, 分别运行

0、

1、

2、3 h, 然后取

1 h 运行样分别高压静止

0、

3、12 h, 迅速释放临界 气体后取样 ,在OLYM PUS显微镜下放大

1 600 倍镜 检 ,观察视野内破壁、破膜及是否有内突外吐现象, 显微照相后计算图片内破壁孢子数与总孢子数之 比即破壁百分率 .

2 .

2 匀浆破壁处理法 取10 g灵芝孢子粉, 加入水

100 mL, 于匀浆机 点动匀 浆,每5min取样, 匀浆30 m in, 取样 在OLYMPUS 显微镜下放大1 600倍镜检 ,计算破壁百 分率.

2 .

3 超声破壁处理法 取灵 芝孢子粉5g加 水100 mL于250 W 、

40 KHZ的条件下置于 KQ - 250DB 型数控超声波清 洗器中 超声 , 每30 m in取样, 超声

3 h, 取 样在 OLYMPUS 显微镜下放大1 600倍镜检 ,计算破壁百 分率.

3 结果与分析

3 .

1 CO2 超临界破壁处理法 由表 1, 可明显看出, 分别采用运行时间

1、

2 和3h的临界运行后 ,瞬间释放临界 CO2 , 取样镜检 后 ,在运行

3 h后破壁率最高为

26 . 65%, 然而在将 运行1 h 后的临界破壁样在进行高压静止运行后, 采用保压12 h 后的灵芝孢子破壁率最高 ,远高出直 接运行而不经高压静止的最高破壁率

3 . 4倍.3.2匀浆破壁处理法 从表 2,可以看出,随着点动匀浆时间的增加, 孢子破壁率增加显著, 但20 m in 后,破壁率增加缓 慢.经匀浆破壁处理 ,破壁率和破壁程度较超临界 效果差( 图1). 表1不同超临界条件下破壁效果比较 Table

1 The compare of the effect of the differen t supercritical conditions 运行时间 (h) Run ti m e 高压静止时间 (h) H igh pressure rest time 破壁率 (%) The rate ofw a ll - cracking

1 0

10 .

0 2

0 20 .

3 3

0 26 .

6 1

1 22 .

5 1

3 45 .

4 1

12 85 .

7 表2不同匀浆时间破壁效果比较 Tab le

2 The compare of the effect of the d ifferent ho m ogenating- time 匀浆时间 (m in) H om ogenating- tim e 破壁率 (%) The rate of w all - cracking

5 5 .

8 10

12 .

3 15

15 .

6 20

20 .

0 25

24 .

8 30

26 .

7 表3不同超声时间灵芝孢子破壁效果比较 Tab le

3 The compare of the effect of the d ifferent ultrasonicing- ti m e 超声时间 (m in) Ultrasonicing- ti m e 破壁率 (%) The rate ofw all- cracking

10 7.

2 20 9.

0 30

10 .

1 40

11 .

6 50

13 .

8 60

15 .

3 3 .

3 超声破壁处理法 从表 3,可以明显看出, 随着超声时间的增加 , 孢子破壁率有增加趋势 ,但不显著, 破壁率最高达

15 . 3%.

3 .

4 三种破壁方法的显微形态对比分析 从镜检结果显示 ,经破壁的孢子, 孢子壁破碎 成块状 , 有内突变扁 、萌发孔处外吐和空泡现象 . 在匀浆和超声处理的孢子还可见到一些孢子虽然 外形完整, 但其内部已出现中空, 此现象说明其内 容物已被抽提到外部的溶媒质中.

217 4期 薛艳华等: 灵芝孢子几种破壁方法比较分析 图1不同方法的破壁效果 1. 破壁前完整的孢子 ;

2. 超临界处理的孢子 ;

3 . 匀浆处理的孢子 ;

4 . 超声处理的孢子 Fig .

1 The sporoder m- broken effect of differen t d isintegrating m ethods

1 . The intact spores , 2. The supercritica l disintegrating spores, 3. H om ogenate disintegrating spores, 4. U ltrasonic disintegrating spores