PDF《鳖甲药材指纹图谱与其抗肝纤维化作用的谱效关系研究=》

12 批 鳖甲药材供试品 HPLC 图谱进行处理,生成对照指 纹图谱,见图 1. 2.1.5 共有峰的标定 采用相对保留时间标定共有 A-12 批样品 B-共有指纹图谱 C-混合对照品 5(S)-尿苷 7-鸟苷 A-12 batches of samples B-common fingerprint C-mixed reference substances 5(S)-uridine 7-guanosine 图1不同产地鳖甲药材的 HPLC 指纹图谱 Fig.

1 HPLC fingerprint of Trionycis Carapax samples from different regions A B C S12 ↑ S1 5(S)

7 1

2 3

4 5(S)

6 7

8 0

10 20

30 40

50 60

70 t / min ・2508・ 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第45 卷第17 期2014 年9月指纹峰, 结果

12 批鳖甲标定了

7 个共有峰, 占总峰 面积的 73.4%.经混合对照品的 HPLC 图定位,鉴 定出

2 个色谱峰,

5、7 号峰分别为尿苷、鸟苷,见图1. 2.1.6 鳖甲药材指纹图谱主成分分析 (PCA) PCA 是将原来众多具有一定相关性的指标重新组合成一 组新的相互无关的综合指标来代替原来指标的统计 方法,也是数学上处理降维的一种方法[8] .本实验 运用 SPSS 19.0 统计分析软件进行 PCA,得到主成 分方差以及初始因子载荷矩阵,结果见表

2、3.由 主成分的贡献率可知,主成分

1 的贡献率最大为 36.744%, 主成分

2 和3贡献率其次分别为 25.299%、 21.169%,其他成分的贡献率较小,系统自动提取 了前

3 个特征根大于

1 的主成分,其累积方差贡献 率达到 83.212%,可用这

3 个主成分新变量代替原 有的

7 个变量. 表2鳖甲主成分分析贡献率及累积贡献率 Table

2 Contribution rate and cumulative contribution rate of PCA in Trionycis Carapax 初始特征值 提取特征值 主成分 特征根 方差贡献率 / % 累积方差贡献率 / % 特征根 方差贡献率 / % 累积方差贡献率 / %

1 2.572 36.744 36.744 2.572 36.744 36.744

2 1.771 25.299 62.043 1.771 25.299 62.043

3 1.482 21.169 83.212 1.482 21.169 83.212 表3初始因子载荷矩阵 Table

3 Matrix of initial factors 主成分 主成分 峰位

1 2

3 峰位

1 2

3 1 0.569 0.341 0.640

4 0.839 ?0.360 0.011

2 0.405 0.822 ?0.110

6 0.356 ?0.560 ?0.603

3 0.328 ?0.410 0.737

8 0.596 0.554 ?0.359 初始因子载荷矩阵中,每1个载荷量表示主成 分与对应变量的相关系数,将主成分载荷矩阵中的 数据除以主成分相对应的特征值开平方根便得到

3 个主成分中每个指标所对应的系数,经计算可得主 成分模型:F1=0.355 X1+0.253 X2+0.205 X3+ 0.523 X4+0.222 X6+0.372 X8;

F2=0.256 X1+0.618 X2-0.308 X3-0.271 X4-0.421 X6+0.416 X8;

F3= 0.526 X1-0.009 X2+0.605 X3+0.009 X4-0.496 X6- 0.295 X8,其中 F

1、F

2、F3 表示

3 个主成分,X

1、 X

2、X3……X8 表示各个色谱峰(峰

1、

2、3……8) 相对于参照峰(峰5)的相对峰面积.在3个主成 分中,F1 是特征值最大的, 信息量最全面 的指 标,而第

1 主成分中 X4 的系数最大,表明峰

4 的量 在鳖甲药材的质量控制中有相对重要的作用,本实 验室将进一步分析峰

4 为何种化合物,为鳖甲的质 量控制提供科学依据. 2.2 抗肝纤维化作用研究 2.2.1 样品添加量考察 复苏后的 LX-2 肝星状细 胞均匀接种于 DMEM 培养液中(含20%胎牛血清、 1*10 U/L 青霉素、100 mg/L 链霉素以及所需氨基 酸和葡萄糖等营养物质) ,于37 ℃、5% CO2 培养 箱中培养, 当细胞处于对数生长期时, 用胰酶消化, 培养液悬浮细胞. 调整细胞浓度后, 接种于

96 孔培 养板培养