PDF《4卷第4期》

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7 第14卷第4 期l999年

1 2月中国病毒学VIROLOGr CA SI Nf CA Ⅷ

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1 999 一种新的重组腺 病 毒的构 建 及其对 人肿 瘤细胞 的影响 ( 武 汉大 学病 毒学 研究所 .

武汉

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7 2 ) R7 ;

口.矸摘要腺病毒 E1 A 基因诱 导细 胞j J } l 亡,E1B19K基因及 E

1 B

5 5 K基 因抑制 细胞 凋亡 , 前 者被 克隆 到腺病 毒转 移载 体FCA1 3的HCM3 ~ I E启 动子 下游 , 构建成转 移载 体pCA EZ A . 采用lil:~ofeetin法 将pCAE1A和 含腺病 毒基 因组 ( El区、 E 3区缺 失)的质 粒pBHG1 1共转 染293细 胞,7~1

0 d后得到重 组病 毒vSAd4.用 v

5 Ad 4感染 人碲 腺癌 细胞 系A549,结果 表明v5Ad4有 明显杀 伤和 裂解 肿瘤 细胞 功能 .在人 胚肺 正常二 倍体 细胞 中, v S A d 4没有表现 出可见 的细胞 毒效应 . 迄 今为止, 恶性肿瘤治疗 的主要策 略仍 然是手术 、 放疗和化疗 .然ifl『基于对肿瘤分子 生物 学的深入研 究. 近年来癌症的基因治疗 作为一种新的治疗手 段得 到迅 速 发展.腺病毒 ( A d e n ― o v i r u s ) 载体 由于基 因组结构简单 , 遗 传背景 比较清楚 , 易于改造和操作 , 而且转 染率 高, 又 有较 好的靶细胞特异性 , 因而作为 向癌细胞导 入外源基 因的工具而备 受嘱 目. 腺病 毒属 D NA肿瘤病毒, 基 因组 为线状 双链 D NA, 长约36kb.位 于腺病 毒 5型

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4 ~

3 5

8 b p处的 田 因子为 c j

5 一 元件, 是包装病 毒DN A必 需的信号, 它的缺 失造成病 毒基 因组 不能被包装 , 但不影响病 毒基因组 在被感染 细胞 中复制 的可能性 n I .早期 基因E1 A、 E

1 B是 复制 必须基 因, 它 们的缺失造成流产感 染, 但在

2 9 3细胞( 整合 有腺病毒 的El区) 中可以复制 并形 成病毒粒子 .E 3为病毒复制非出须区, 常被缺 失以提 高腺病 毒载体 的克 隆容 量.目前, 腺病毒主要被 用作外源基 因如抑癌基 因Rh 、 p

5 3 , 细胞毒性 基因HS Vt k _

2 】 , 各种 免疫刺 激 园子 I L .

2 、 I L .

4 、 I L .

6 、 GM. C S F '

、 T NF、 核酶等的瞬时表达载体. 最近研究发现.缺失E1 B

5 5 K基 因的腺病毒能在 p

5 3基因突变 的肿瘤细胞 中选 择性 繁殖 并裂解 杀死 肿瘤细 胞.而在正常 细胞 中只能发生流 产感染 】 . 为选 择性 杀 死肿瘤 细胞的腺 病毒 基 因治疗载体 的研 究开辟了一 条全新的途 径.研究表明, 腺病毒 E

1 A一方面具有转 化功能 , 另一方 面它的表达会 延长 抑癌 基因 p

5 3的 半衰期等, 提高 p

5 3 的表达量 , 引发 p

5 3 依赖或不依赖 的癌细胞凋亡【 B 】 , 并显著 降低多种 人恶性肿瘤 细胞 系的致瘤 性j.近来研 究证 明. E1 A的表 达能下调在 卵巢 癌、乳腺 癌、 肺癌等 常伴 有的原 癌基因 HE R.

2 / n e u的过量表 达. 并抑制 肿瘤及 其转移 . 增 加肿 瘤对化疗 的敏感性 【 l . E1 B的两个表达 产物

1 9 k和55k蛋 白均可抑制 p

5 3依赖的凋亡. 前者还 可抑制 p

5 3非依赖的 凋亡, 并具有与 b d 一 2等 同的 亡抑制 功效l I .E1 B

5 5 k 一19k的重组腺病 毒l2型 引起 p

5 3表收稿日期 :

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9 8―0 7―0

2 . 收回日期 }

1 9

9 8―1 1―2

7 国家 自然科学 基金高 授术新 探索项 目资卧课题 (

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1 ) 料联系与 负责作 者 维普资讯 http://www.cqvip.com 第 4期 苏 霏等 : 一 种新 的重组 腺病 毒的 构建 及其 对^ 肿借细 胞的 影响