PDF《受理号：CSZ1600116》

粪便 样本中维生素 C 含量≤14μg/g、尼莫司汀含量≤50 μg/g、盐酸 吉西他滨含量≤5mg/g、苯丁酸氮芥含量≤120μg/g 时,对检 测结果不会产生影响. 线性范围评估中,申请人采用高浓度 miR-92a 阳性参考 品梯度稀释于提取的不含 miR-92a 基因的粪便样本中,分别 重复检测

3 次,得出线性相关系数 r2 ≥0.980 的线性范围为

102 copies/μL-106 copies/μL. 针对核酸提取纯化步骤,申请人对其生产的核酸提取试 剂进行研究,结果显示该试剂盒核酸提取效率大于 90%,提 取样本用于试剂盒检测性能良好.通过以上评价,选择晋百 慧公司生产的核酸提取试剂(备案号为:粤深械备

20150228 号)作为该产品核酸提取纯化方法. 本次申报产品包装规格为

48 份/盒,申请人提供了六批 产品(批号为:

20131201、

20131202、

20131203、

20161001、

20161002、20161003)在所有适用机型上的性能评估资料.

(四)阳性判断值 通过深圳人民医院提供的健康人的粪便样本

150 例、大 肠癌患者样本

120 例,同时从香港中文大学获得

49 例正常

10 /

17 人粪便样本、76 例大肠癌患者粪便样本、36 例息肉患者粪 便样本、30 例肝癌患者粪便样本、30 例肠炎患者粪便样本、

30 例食道癌患者粪便样本、30 例胃癌患者粪便样本、30 例 腺瘤患者粪便样本、30 例胃炎患者粪便样本、30 例阑尾炎 患者粪便样本、30 例结肠炎患者粪便样本、30 例消化性溃 疡患者粪便样本、30 例胰腺癌患者粪便样本、30 例胆管癌 患者粪便样本、30 例口腔癌患者粪便样本,采用 miR-92a 检 测试剂盒(荧光 RT-PCR 法)对其进行检测,检测结果采用 SPSS15.0 统计分析软件进行 ROC 曲线分析,根据约登指数 的分析结果,取约登指数最大所对应的 Ct 值为阳性判断值 (Cut-off)为30.75. 试剂盒有效性判定: 1.质控品 1:Ct 值在 30.70-32.3 范围内且有明显指数增 长期;

2.质控品 2:Ct 值>

36.00 或无 Ct 值,线形为直线或轻 微斜线,无明显指数增长期;

以上结果符合要求,检测结果才有意义;

否则,应重复 检测. 结果判定: 1.样本的 Ct 值>

30.75 时,检测结果判定为阴性;

2.样本的 Ct 值≤30.75 时,检测结果判定为阳性.

(五)稳定性

11 /

17 申请人对该产品实时稳定性、开瓶稳定性、冻融稳定性 进行了系统的研究,确定了在各种条件下本产品的有效保存 时间. 其中针对实时稳定性研究,采用三批次试剂盒(批号:

20131201、

20131202、20131203)储存于-20℃条件下,分别 在

0、

3、

6、

9、

12、15 个月进行准确度、分析特异性、精 密度、检测限以及干扰物质检验,12 个月后各项指标符合成 品质量要求,确定产品在-20℃条件下,可稳定保存

12 个月. 开瓶稳定性采用三批次试剂盒(批号:

20131201、

20131202、20131203)开瓶后至于-20℃条件下冷冻保存,在 有效期的第六个月和第十二个月后分别对其准确度、分析特 异性、精密度、检测限以及干扰物质进行检验,产品各项指 标符合成品质量要求,因此开瓶稳定性为

12 个月. 冻融稳定性采用三批次试剂盒(批号:

20131201、

20131202、20131203)开瓶后至于室温下解冻,待其完全解 冻并放置约

15 分钟左右后,置于-20℃以下冷冻,每冻融

2 次分别对其准确度、分析特异性、精密度、检测限以及干扰 物质进行检验,总共冻融