PPT《分子生物学实验》

一、实验器材 离心机,水浴锅,电泳仪,微波炉,凝胶成像系统,涡旋振荡器,移液器,小刀,1.5 ml离心管,吸头,离心管架等

二、试剂

(一)玻璃奶法 普通琼脂糖,EB,TBE,上样缓冲液,DNA marker,碘化钠,玻璃奶,漂洗液,无水乙醇,除菌TE或者去离子水等.

(二)普通DNA凝胶回收试剂盒法 天根生化科技(北京)有限公司DP209-离心柱型-普通DNA凝胶回收试剂盒等

三、实验材料 待回收DNA 【实验用品】 1. 制备1%的常规琼脂糖凝胶,上样电泳;

2. 紫外光下切取目的DNA条带所在的凝胶块,修除去掉无DNA的凝胶部分;

3. 称量修理后的凝胶块重量,置于1.5 ml离心管中,加入3倍体积(V/W)的熔胶液碘化钠溶液;

4. 盖好离心管盖子,约55℃水浴至凝胶完全溶化;

5. 漩涡振荡混匀玻璃奶后取20 μl加入完全溶化的凝胶液中,室温颠倒混匀5 min;

玻璃奶法 【实验操作】 6. 室温、*12 000g离心30秒,小心吸除上清液;

7. 加入0.5 ml 漂洗液,混匀,室温、*12 000g离心30秒,小心吸除上清液;

8. 重复上一步两次;

9. 吸水纸上倒置,室温干燥约15 min;

10. 加入20 μl 除菌的TE或者去离子水,手指弹离心管底,混匀后55℃水浴5 min助溶;

11. 室温、*12 000g........